WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 |

Ультразвуковые и молекулярно-биологические критерии ранней диагностики рака яичников

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи






ЛЮСТИК Анна Валерьевна


Ультразвуковые и молекулярно-биологические критерии ранней диагностики рака яичников


14.01.12 онкология

14.01.13 - лучевая диагностика, лучевая терапия

http://rncrr.ru








Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук







Москва- 2012

Работа выполнена в ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России


Научные руководители:

Член-корр.РАМН, профессор Солодкий Владимир Алексеевич

Член-корр. РАМН, профессор Ашрафян Левон Андреевич

Официальные оппоненты:

- доктор медицинских наук, профессор Кузнецов Виктор Васильевич,

ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина» РАМН, отделение гинекологии, руководитель отделения

- доктор медицинских наук, профессор Котляров Петр Михайлович,

ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России, отдел лучевой рентгеновской диагностики, руководитель отдела

Ведущая организация: ФГБУ «Медицинский радиологический научный центр» Минздрава России (г.Обнинск)

Защита состоится «24» декабря 2012 года в 14.30 часов на заседании диссертационного совета Д 208.081.01 при ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России (117997, Москва, ул. Профсоюзная 86).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России (117997, Москва, ул. Профсоюзная 86).

Автореферат разослан « » ноября 2012г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук, профессор З.С.Цаллагова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы:

Рак яичников составляет 4–6% среди злокачественных опухолей у женщин, занимая седьмое место по частоте. По данным Международного агентства по изучению рака ежегодно в мире регистрируется более 165 тыс. новых случаев рака яичников и более 100 тыс. женщин умирают от этого заболевания [IARC Sci Publ. Lyon. 1997]. В России ежегодно рак яичников выявляется более чем у 11 000 женщин (10,17 на 100 000), занимая седьмое место в структуре общей онкологической заболеваемости (5%) и третье – среди гинекологических опухолей, после рака тела и шейки матки [В.И. Чиссов и др. 2007]. В связи с поздней диагностикой заболевания, летальность больных раком яичников, на первом году после установления диагноза, составляет 35%, преимущественно за счет больных III и IV стадиями заболевания, число которых достигает 70%. Вследствие высокой смертности, вопросы ранней диагностики рака яичников продолжают оставаться одними из важных и актуальных задач клинической онкологии [Кузнецов В.В. с соавт. 2011]. На данном этапе развития медицинской науки в практику вошел алгоритм диагностики новообразований яичников, основанный на применении современных инструментальных и лабораторных методов исследования [Ашрафян Л.А. и др. 2009]. В современных условиях на дооперационном этапе ультразвуковое исследование (УЗИ) является необходимым скрининговым методом диагностики, позволяющим неинвазивно и наиболее точно определить характер процесса, его нозологическую принадлежность [Котляров П.М. и др. 2003], что имеет огромное значение при выборе последующей рациональной тактики ведения больных [Ашрафян Л.А. и др. 2007, Бохман Я.В. 2002, Ганцев Ш.Х. и др. 2003]. В последние годы отдается предпочтение трансвагинальной эхографии с применением акустических излучателей, обладающих высокой разрешающей способностью. Даже сам факт наличия или отсутствия внутриопухолевого кровотока является важным дифференциально-диагностическим признаком при дифференциации опухолей яичников [Анисимов В.Н. и др. 2004, Вихляева Е.М. 2008].

Одним из широко используемых методов в распознавании рака яичников стало определение ряда специфических и неспецифических опухолевых маркеров (СА-125,СА-19-9, СА-15-5, СА-12-4, СА 72-4, МСА) [Серов В.Н. и др. 2001, Акопова Н.Б. 2002, Aoki M. 2004]. Многолетняя история развития этого направления в диагностике злокачественных опухолей придатков матки сформировало убедительную точку зрения о бесперспективности их использования в рамках скрининговых программ. Особенно хорошо в этом плане изучена роль маркера СА-125, который продолжает оставаться одним из самых востребованных диагностических тестов при раке яичников.



Интенсивное развитие протеомных технологий открыло новые перспективы для поиска биомаркеров заболеваний. Одной из новых и наиболее высокопроизводительных и перспективных платформ для поиска биомаркеров является масс-спектрометрическая технология белковых чипов SELDI-TOF(Surface-enhancedlaserdesorption/ionizationtime-of-flight, усиленная поверхностью времяпролетная лазерная десорбция/ионизация). Применение масс-спектрометрии SELDI-TOF в этих целях началось около пяти лет назад и сразу показало многообещающие результаты. В ряде работ была продемонстрирована точность диагностики, близкая к 100% [Petricoinetal 2002, Kozaketal 2003]. Однако неудовлетворительная воспроизводимость результатов разными лабораториями и во многих случаях неизвестная природа дискриминаторных масс-спектрометрических пиков породили сомнения в возможности внедрения результатов в практическую медицину.

Результаты идентифицированных с использованием технологии SELDI-TOF биомаркеров рака яичника показывают, что все они являются белками, присутствующими в сыворотке в достаточно высоких (микромолярных) концентрациях, а изменение их уровня обусловлено системным ответом организма на сопутствующее опухоли воспаление.

Анализируя сложившуюся ситуацию в рамках скрининга рака яичников и, учитывая сложившуюся технологию и опыт на этапе первичной диагностики, а также переосмысливая ряд клинических и патогенетических аспектов рака яичников, мы видим ряд перспективных направлений, позволяющих по новому развить раннюю диагностику этого заболевания.

Цель исследования:

Разработка ультразвуковых и молекулярно-биологических критериев ранней диагностики рака яичников.

Задачи исследования:

  1. Изучить и выделить эхосемиотические критерии начальных стадий рака яичников.
  2. Определить особенности неоваскуляризации и параметры кровотока при начальных формах рака яичников.
  3. Изучить информативность маркера СА-125 в группе больных начальным раком яичников.
  4. Оценить информативность (чувствительность и специфичность) маркера СА-125 при скрининговом обследовании пациенток постменопаузального периода.
  5. Оценить информативность (чувствительность и специфичность) сонографии при скрининговом обследовании пациенток постменопаузального периода.
  6. Оценить чувствительность и специфичность метода масс-спектрометрического профилирования сыворотки крови при асцитном варианте рака яичников.



Новизна исследования:

  1. На основе выполненного научного исследования пересмотрены принципы раннего выявления рака яичников и обозначен спектр диагностических методов с отработанными критериями раннего опухолевого процесса.
  2. С использованием современных технологий ультразвуковой диагностики (3D, спектральная ангиография и допплерометрия) определены критерии начального рака яичников.
  3. Впервые проведен скрининг в группе женщин постменопаузального возраста с использованием жесткого маркерного анализа (СА-125 в диапазоне 36-65 МЕ/мл) и ультразвукового мониторинга.

4. Изучен масс-спектрометрический профиль асцитных форм рака яичника, установлена его специфичность.


Практическая значимость.

В работе представлен алгоритм необходимых обследований (с использованием лучевых методик и молекулярно-биологических маркеров) в группе женщин постменопаузального периода для своевременного выявления злокачественных новообразований яичников. Также в рамках настоящего исследования внедрен метод масс-спектрометрического профилирования сыворотки крови у пациентов с заболеваниями яичников, дифференцирующий злокачественную природу асцита.

Основные положения, выносимые на защиту:

  1. Увеличение чувствительности маркера СА-125 в рамках ранней диагностики рака яичников может быть обеспечено снижением уровня его учета в сыворотке крови в диапазоне 36 -65 МЕ/мл.
  2. Увеличение чувствительности ультразвукового метода в рамках первичной диагностики рака яичников возможно при использовании, выделенных нами, специфических критериев начального опухолевого процесса, которыми являются: множественные нелинейные включения, центральное расположение зон васкуляризации, наличие множественных хаотичных цветовых локусов, высокая скорость артериального внутриопухолевого кровотока, низкая резистентность, снижение резистентности артериального кровотока от периферии к центру опухоли, а также высокая максимальная скорость внутриопухолевого венозного кровотока.
  3. Выявление рака яичников на начальных стадиях возможно лишь при I патогенетическом варианте заболевания и может быть обеспечено только в группе пациенток постменопаузального периода с использованием современной сонографии и маркерного скрининга.

Внедрение результатов исследования.





Результаты проведенного исследования используются врачами отделений онкогинекологии, гинекологии, молекулярной онкологии.

Апробация материалов диссертации и публикации.

Результаты работы доложены на Всероссийской конференции онкологов «Проблемы онкологии» (Санкт-Петербург, 2009).

Апробация диссертации состоялась на научно-практической конференции ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России 29 октября 2012 года.

По теме диссертации опубликовано 4 печатные работы, из них 3 в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ.


Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 151 странице машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала и методов исследования, 2 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 315 источников, из них 106 отечественных и 209 зарубежных. Работа иллюстрирована 13 таблицами, 29 рисунками.


ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ.

Материалы и методы исследования.

В соответствии с основной целью настоящего исследования и для решения поставленных задач, в ФГБУ «РНЦРР» Минздрава России, в период с 2002 по 2011 гг., по поводу рака яичников, было комплексно обследовано 214 женщин. С учетом ранее выделенных нами двух патогенетических вариантов развития рака яичников, пациентки были разделены на 2 группы:

- первая группа А - 68 пациенток с локализованным или относительно локализованным процессом в яичниках без клинических проявлений асцита (стадии Iа, Ib, IIa, IIb).

- вторая группа Б - 146 пациенток с асцитной формой рака яичников с обширным поражением висцеральной и париетальной брюшины, метастазами в большой сальник (стадии IIс,IIIс). В исследование включались только пациентки с серозным вариантом рака яичников.

Отдельную группу составили 2440 пациенток постменопаузального периода, которым в качестве скрининга выполнено исследование маркера СА-125 и эхография органов малого таза. У 266 из них установлен “синдром увеличенных яичников”.

Маркер СА-125 определялся иммуноферментным методом с использованием системы ADVIA Centaur CP.

Ультразвуковое исследование проводилось на ультразвуковом сканере "Voluson - 530D MT" фирмы Kretztechnik.

Изучались возможности новых режимов сканирования, таких как трехмерная эхография, допплерографические методики и трехмерная ультразвуковая ангиография.

При проведении ультразвукового исследования нами был применен комплекс следующих методик:

1. Двухмерная эхография в В-режиме.

2. Трехмерная эхография в В-режиме.

3. Цветовое допплеровское картирование.

4. Энергетическое картирование.

5. Спектральная допплерография.

6. Трехмерная ультразвуковая ангиография.

Ультразвуковое исследование осуществлялось с помощью мультичастотных, широкополосных датчиков, с возможностью сбора объемной информации в автоматическом режиме. Для трансабдоминального исследования использовался датчик S-VAWA-7, с частотой 3,5-5МГц. Для трансвагинального исследования использовался внутриполостной датчик S-VDV5-8B, с частотой 5-8,5МГц.

Исследование начиналось с выбора интересующего участка в двухмерном В-режиме. Затем включался либо режим цветового допплеровского картирования, либо режим энергетического картирования и «цветовое окно» помещалось на интересующую область. Далее, в режиме объемного сканирования выбиралась скорость и дуга сканирования, и производилась локация объема в автоматическом режиме. Полученное объемное изображение обрабатывалось в режиме поверхностной реконструкции. После создания объемной картины внутриопухолевого сосудистого рисунка проводилась качественная оценка васкуляризации: оценивались равномерность распределения сосудов в структуре образования, их форма, диаметр и характер хода.

Ультразвуковые изображения архивировались на жестком диске рабочей станции ультразвукового сканера, магнито-оптических дисках, флоппи дисках, видеопленке и термобумаге.

Масс-спектрометрические исследования выполнены у 34 пациенток с асцитным вариантом рака яичников. Группу контроля в рамках данного исследования составили 50 здоровых женщин, 29 пациенток с колоректальным раком и 34 пациентки с сифилисом. Масс-спектрометрия выполнялась в институте биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова.

Фракционирование образцов сыворотки крови проводили на автоматизированной платформе ClinProt robot (Bruker Daltonics, Германия). Для фракционирования использовали стандартные наборы для профилирования, содержащие магнитные микрочастицы с функционализированной поверхностью MB-HIC 8, MB-HIC 18, MB-WCX и MB-IMAC Cu производства компании Bruker Daltonics, Германия. Масс-спектрометрические данные анализировали с использованием компьютерной программы ClinProTools 2.1 (Bruker Daltonics, Германия). Математические модели для классификации масс-спектров, полученных после профилирования сыворотки крови, строили на основе Генетического Алгоритма (ГА) и алгоритма Управляемой Нейронной Сети (УНС).

Основная схемы реализации масс-спектрометрии сопряжена со следующей этапностью:

- забор сыворотки крови;

- фракционирование образцов сыворотки крови;

- фракционирования с использованием MB-WCX;

- протокол фракционирования с использованием MB-HIC 8 (18);

- протокол фракционирования с использованием MB-IMAC Cu;

- десорбция пептидов с белков крови;

- анализ масс-спектрометрических данных.



Pages:   || 2 | 3 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.