WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 |

Закономерности структурной дифференцировки печени и селезенки эмбрионов и плодов человека в ранние сроки беременности в норме и при воздействии на мать факторов шинного производства

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Обухова

Лариса Евстигнеевна

ЗАКОНОМЕРНОСТИ СТРУКТУРНОЙ

ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ ПЕЧЕНИ И СЕЛЕЗЕНКИ ЭМБРИОНОВ И ПЛОДОВ ЧЕЛОВЕКА В РАННИЕ СРОКИ БЕРЕМЕННОСТИ В НОРМЕ И ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НА МАТЬ ФАКТОРОВ ШИННОГО ПРОИЗВОДСТВА

14.03.01 анатомия человека

Автореферат

на соискание ученой степени

доктора медицинских наук

Барнаул – 2011

Работа выполнена в ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России

Научные консультанты: Доктор медицинских наук, профессор

Высоцкий Юрий Александрович

Доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук,

профессор Калачев Геннадий Анатольевич

доктор медицинских наук, Майбородин Игорь Валентинович

профессор

доктор медицинских наук, Машак Александр Николаевич

профессор

Ведущая организация: Красноярский государственный медицинский университет

Защита состоится « 27 » октября 2011 г. в 1000 часов на заседании диссертационного совета Д 208.002.02 при ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России (656038, Россия, г. Барнаул, пр. Ленина, 40).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России

Автореферат разослан « 20 » сентября 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук, профессор Е.А. Цеймах

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время для антенатальной профилактики смертности и заболеваний плода важное значение имеет раскрытие механизмов взаимосвязи эмбриона и плода с матерью на различных этапах беременности. Наибольшую значимость в эмбриологии имеет изучение механизмов адаптации матери и плода в физиологических и патологических условиях (Л.А. Колейчик, 2002; Н.И. Барсукова, 2010; Б.Л. Пономарев и соавт., 2004; Ю.И. Склянов и соавт., 2005). Ранний онтогенез и особенно становление органов в период эмбриогенеза изучены явно недостаточно. При этом работы по онтогенезу органов посвящены, в основном, анализу характера изменений в органах и системах плода.

Все чаще в акушерской практике наблюдаются различные нарушения беременности, приводящие к преждевременным родам и рождению потомства с функциональными нарушениями различных органов (А.Н. Стрижаков и соавт., 2004; З.З. Токова, 2004; А.В. Островская и соавт., 2008; Г.Т. Сухих и соавт., 2008; М.Л. Сизенко, Г.В. Брюхин, 2009; D.J. Baker, 2000).

Установлена зависимость регуляции эмбриогенеза от комплекса внутренних и внешних факторов (Л.М. Петрова и соавт., 2007).

Изучение гистогенеза паренхиматозных и стромальных структур органов в ранние сроки беременности, их взаимодействия между собой, раскрытие природы этих процессов имеет принципиальное значение в понимании структурных основ функционирования эмбриона и плода в целом. Успешное решение этих вопросов позволит определить подходы к целенаправленной коррекции возможных патологических изменений, возникающих в органах эмбрионов и плодов в условиях патологии.

Особое место в кроветворении у эмбриона и плода занимают печень и селезенка, которые обеспечивают функционирование и стабилизацию системы мать-плацента-плод.

Отсутствие целостной картины складывающихся сосудисто-паренхиматозных взаимоотношений в органах в первом триместре беременности побуждает к более тщательному изучению их становления. Межклеточное взаимодействие стромальной и гемопоэтической ткани осуществляется в результате их регуляторного влияния друг на друга (А.И. Воробьев, 2002; В.Т. Морозова, 2003). Изучение особенностей эмбрио- и фетогенеза печени и селезенки будет способствовать выяснению причин возникновения некоторых патологических состояний у человека, раскрытию особенностей взаимодействия матери и плода.

Цель исследования - выявить закономерности становления стромальных, паренхиматозных элементов и капилляров печени и селезенки эмбрионов и плодов человека в ранние сроки беременности в норме и при воздействии на организм матери комплексного влияния факторов шинного производства.

Задачи исследования:

  1. Установить закономерности дифференцировки стромальных и паренхиматозных элементов печени и селезенки эмбрионов и плодов человека в ранние сроки физиологической беременности.
  2. Исследовать взаимоотношения клеток паренхимы и стромы с эндотелиальными клетками формирующихся капилляров печени и селезенки в ранние сроки эмбрионального развития, и определить их роль в ангиогенезе.

3. Выявить особенности формирования стенки кровеносных капилляров печени и селезенки в поздние сроки эмбриогенеза и ранние сроки фетогенеза.

4. Изучить особенности формирования паренхиматозных и стромальных элементов печени и селезенки у эмбрионов и плодов в ранние сроки беременности от матерей, испытывающих негативное воздействие факторов шинного производства.

5. Исследовать реакцию ядер клеток печени и селезенки эмбрионов и плодов человека в интерфазе митотического цикла в условиях воздействия на мать факторов шинного производства.



6. Изучить действие факторов шинного производства на митотическую активность клеток печени и селезенки эмбрионов и плодов человека в ранние сроки эмбрионального развития.

Научная новизна исследования

Впервые на электронно-микроскопическом уровне представлены сведения о закономерностях взаимоотношений паренхиматозных и стромальных элементов печени и селезенки с кровеносными капиллярами в раннем периоде внутриутробного развития. Установлено, что дифференцировка клеток стромы влечет за собой созревание капилляров. На ранних этапах внутриутробного развития гистогенез стромы печени и селезенки протекает по единому плану: формирование стенки кровеносных капилляров происходит при взаимодействии эндотелиальных клеток с элементами паренхимы печени и ретикулярными клетками селезенки. Установлено, что структурные механизмы формирования базальной мембраны печени и селезенки эмбрионов и плодов человека являются универсальными.

Определены закономерности формирования капилляров печени и селезенки в ранние сроки беременности. Показано, что основные процессы, характеризующие созревание эндотелиального пласта, выражаются формированием базальной мембраны и усложнением межклеточных коммуникаций. В ходе дифференцировки печени и селезенки на ранних этапах эмбрионального развития происходит смена простых межклеточных контактов на полудесмосомы и десмосомы.

Впервые изучена динамика становления ультраструктурных компонентов цитоплазмы и ядер клеток паренхимы печени и стромы селезенки у плода в ранние сроки беременности. Выявлено, что хроматиновые структуры проявляют высокую лабильность в зависимости от срока внутриутробного развития.

Впервые установлено, что под воздействием факторов шинного производства в цитоплазме клеток печени и селезенки эмбриона и плода происходит вакуолизация митохондрий, расширение эндоплазматического ретикулума, появляются вакуоли, снижается генетически активная фракция хроматина, что ведет к уменьшению их функциональной и митотической активности. Расширения в базальной мембране капилляра делает его более уязвимым для окружающей среды.

Теоретическое и практическое значение

Установлены этапы становления паренхимы печени и стромы селезенки, как в позднем эмбриональном, так и в раннем плодном периодах органогенеза. Установленная взаимосвязь паренхиматозных и стромальных структур с кровеносными капиллярами углубляет представление о закономерностях развития печени и селезенки, их роли в формировании организма в антенатальный период.

Выявленные особенности развития кровеносных капилляров в печени и селезенке плодов человека могут служить предпосылкой для уточнения механизмов формирования микроциркуляторного русла в раннем онтогенезе человека. Новые данные о закономерностях становления ультраструктурных компонентов печени и селезенки в антенатальном периоде развивают концепцию о взаимосвязи различных структурных элементов внутри органа.

Данные об особенностях эмбриогенеза печени и селезенки в ранние сроки беременности у женщин - жителей промышленных городов могут быть использованы при разработке мер профилактики таких патологических состояний, как потеря беременности, преждевременные роды, задержка внутриутробного развития. Сведения об особенностях эмбрионального развития печени и селезенки представляют интерес для гистологов, эмбриологов, иммунологов, педиатров и эндокринологов.

Основные положения, выносимые на защиту:

  1. В ранние сроки беременности в процессе трансформации малодифференцированных клеток печени и селезенки эмбрионов и плодов человека в дифференцированные происходит созревание ядер и формирование внутриклеточных органелл.
  2. В процессе генеза стенка формирующегося кровеносного капилляра и клетки окружающей ткани печени и селезенки эмбрионов и плодов образуют систему, элементы которой усложняются, дифференцируются, взаимодействуя и влияя друг на друга.
  3. На ранних этапах внутриутробного развития человека, формирующиеся капилляры печени и селезенки проходят три стадии: от незрелых до дефинитивных.
  4. Воздействие факторов шинного производства на организм матери в ранние сроки беременности приводит к изменениям ультраструктуры мембранных органелл формирующихся клеток печени и селезенки эмбрионов и плодов, выражающихся в вакуолизации митохондрий, расширением гранулярной эндоплазматической сети, увеличением в цитоплазме клеток печени и селезенки числа вакуолей.
  5. Факторы шинного производства, опосредованно воздействуя на фракции ядерного хроматина клеток печени и селезенки эмбрионов и плодов в раннем эмбриогенезе, снижают долю эухроматина.
  6. Неблагоприятные факторы шинного производства, действуя на систему мать-плод, угнетают митотическую активность клеток печени и селезенки эмбрионов и плодов.
  7. Установленные изменения в результате комплексного влияния агентов шинного производства на формирование капилляров могут быть одной из причин нарушения микроциркуляторного русла и морфогенеза печени и селезенки.

Внедрение результатов исследования в практику

Результаты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс кафедр биологии с экологией, нормальной анатомии человека и гистологии Алтайского государственного медицинского университета, используются в лекционном курсе и на практических занятиях со студентами лечебного, педиатрического, стоматологического, фармацевтического и медико- профилактического факультетов.





Апробация работы

Основные положения работы доложены на: конференции по актуальным вопросам лабораторной диагностики (Барнаул, 2001), международной научной конференции «Медико-биологические и экологические проблемы здоровья человека на севере» (Сургут, 2004), на научно-практической конференции с международным участием «Совершенствование онкологической помощи в современных условиях» (Барнаул, 2008), на 1-й международной телеконференции (Томск, 2010), 5-й международной телеконференции (Томск, 2011), межкафедральном заседании в Алтайском государственном медицинском университете (Барнаул, 2011).

Публикации

По теме диссертации опубликована 31 работа, из них в журналах из перечня ВАК - 11.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материалов и методов, двух глав с результатами собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Библиографический указатель содержит 165 отечественных и 134 иностранных источников. Иллюстрированный материал представлен 11 таблицами и 49 рисунками (из них 35 фотографий).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Объект исследования

Материалом для исследования послужили препараты печени и селезенки 240 эмбрионов и плодов человека в период от 7 до 14 недель внутриутробного развития, полученные при прерывании физиологической беременности по социальным показаниям (в соответствии с Постановлениями Правительства РФ от 8 мая 1996 года № 567 и от 11 августа 2003 года № 485). В ходе исследования были соблюдены этические принципы проведения исследований согласно Хельсинской декларации – редакция 2000 г. и получено разрешение локального этического комитета. Забор материала производился при медицинских абортах у практически здоровых матерей в возрасте от 23 до 38 лет, работающих в основных цехах шинного производства не менее 5 лет (основная группа). Работающие в этих цехах подвергались комплексному воздействию факторов шинного производства, не превышающих предельно допустимых норм. В рабочих зонах атмосфера содержала углеводородные соединения (бутадиен, изопрен и др.) в сочетании с высокой температурой, влажностью и шумом. Наиболее распространенной среди работниц на всех этапах производства являлась профессия аппаратчика соответствующего технологического участка. Основная работа заключалась в следующем: контроль за ведением технологического процесса, регистрация соответствующих параметров в журналах и картах, отбор проб, подготовка и уборка рабочего места и других помещений. В качестве группы сравнения использовалась препараты печени плодов, взятые при аборте в те же возрастные сроки от матерей, не работающих в химическом производстве (группа сравнения).

Печень и селезенка, взятые у 240 эмбрионов и плодов, распределены по четырем возрастным группам (таб. 1): 7-8 недель, 9-10 недель, 11-12 и 13-14 недель внутриутробного развития. Возраст плодов и эмбрионов определяли с учетом схем, представленных в работах Б. Пэттена (1959), Э. Поттера (1971), Л.И. Фалина (1976), а также с учетом акушерского анамнеза и данных ультразвукового исследования.

Методы исследования

Полученный материал фиксировали параформом на буфере Миллонига. Для световой микроскопии материал после обезвоживания заливали в парафин. Фотографирование необходимых участков производилось с помощью светового микроскопа Leica ДМЕ, с использованием камеры Leica ЕС 3.

Для электронной микроскопии кусочки органов дофиксировали в 1% растворе осмиевой кислоты. Обезвоживание проводили этанолом, начиная с 300 до абсолютного, затем материал заключали в аралдит. С парафиновых блоков на ротационном микротоме готовили срезы толщиной 7-10 мкм. На срезах, окрашенных общегистологическими методиками: гематоксилин-эозином, световым зеленым, полихромным методом Маллори, по Ван-Гизон, изучалась общая морфология печени и селезенки. Фотографирование необходимых участков производилось с помощью фотонасадки МНФ-8.

Для электронной микроскопии ультратонкие срезы толщиной 40-60 нм изготавливались на ультрамикротоме УМТП-6. Срезы на сетках контрастировали свинцом по Рейнольдсу (Г. Гайер, 1974). Готовые срезы изучались в электронном микроскопе ПЭМ-100 с ускоряющим напряжением 50 и 75 киловольт. Фотографирование необходимых участков производилось при увеличениях на экране микроскопа от 5000-х до 35000-х.

Полученные в процессе работы полутонкие срезы толщиной от 0,5 до 1 мк окрашивали метиленовым синим, изучали и фотографировали с помощью светового микроскопа «Биолар», Leica ДМЕ, с использованием камеры Leica ЕС 3. Данные, полученные в ходе светооптического и ультраструктурного исследования, позволили определить степень функциональной активности органа или всей системы в целом. Одним из методов оценки функционального состояния органа и процессов эмбриогенеза является определение митотической активности клеток.

Подсчет митотического индекса проводили на клетках селезенки и печени. Митотический индекс рассчитывали на 1000 клеток, исходя из данных полученных на 30 эмбрионах и плодах в каждой группе. При подсчете митотически делящихся клеток регистрировали все стадии митоза: профазу, метафазу, анафазу и телофазу (Г.Г. Автандилов и соавт., 1973). Всего было подсчитано 1 650 000 клеток. Митотический индекс вычисляли в промилле.



Pages:   || 2 | 3 | 4 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.