WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

Клинико-диагностическое значение определения антител к эластину и эластазе у больных ревматоидным артритом

-- [ Страница 1 ] --


На правах рукописи







НЕНАШЕВА Наталья Васильевна




КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ
К ЭЛАСТИНУ И ЭЛАСТАЗЕ У БОЛЬНЫХ РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ




14.01.22 ревматология




А в т о р е ф е р а т

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук





Волгоград 2011

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН и ГОУ ВПО «Волгоградский государствен­ный медицинский университет Росздрава»

Научный руководитель:

Заслуженный деятель науки РФ, академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор ЗБОРОВСКИЙ Александр Борисович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Куличенко Людмила Леонидовна

доктор медицинских наук Яльцева Наталья Викторовна

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет Росздрава»

Защита состоится «___» февраля 2011г. в ___ часов на заседании диссертационного совета Д 208.008.02 при ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет Росздрава» по адресу: 400131, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет Росздрава».

Автореферат разослан «___» января 2011г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Д 208.008.02,

доктор медицинских наук А.Р. Бабаева

Актуальность проблемы

Болезни костно-мышечной системы и соединительной ткани входят в число трех наиболее распространенных среди взрослой популяции России классов заболеваний, уступая место лишь болезням системы кровообращения и органов дыхания [Мазуров В. И., 2005; Фоломеева О. М. и др., 2007].

Самым частым воспалительным ревматическим заболеванием (РЗ) признан ревматоидный артрит (РА), ключевым синдромом которого является суставной. Относительный показатель заболеваемости, рассчитанный на 100 тыс. населения, с 2001 по 2005 год увеличился на 3,6%, достигнув значения 204,0 на 100 тыс. Ежегодно в России у 21–23 из 100 тыс. человек впервые в жизни диагностируется РА [Фоломеева О. М. и др., 2007].

Смертность от РА находится в пределах 0,17–0,22% от общей смертности населения [Coste J. et al., 1994]. В то же время продолжительность жизни больных РА — на 10–15 лет короче ожидаемой (популяционной), а пятилетняя выживаемость при тяжелых формах болезни сопоставима с выживаемостью больных ишемической болезнью сердца с поражением трех коронарных артерий или пациентов с III–IV стадиями болезни Ходжкина [O'Dell, 2002]. Частота смерти, обусловленной инфекционными осложнениями РА (которым больные РА подвержены в результате изменения иммунной реактивности, а также в результате применения у них иммунодепрессантов) в 9 раз, осложнениями со стороны почек — в 7 раз, со стороны желудочно-кишечного тракта (связанной, в основном, с побочными эффектами нестероидных противовоспалительных средств, необходимых больным) — в 2 раза выше популяционной. Социальную значимость РА следует оценивать как с точки зрения экономических потерь государства, так и с точки зрения боли, страдания и нарастающего ухудшения качества жизни отдельного пациента [Фоломеева О. М. и др., 2007]. Через 20 лет от начала болезни примерно 90% пациентов в большей или меньшей степени теряют трудоспособность, а треть становится полными инвалидами [Насонов Е. Л., 2002; McGonagle D. et al., 2006].

«Субклинически» текущий иммунопатологический процесс развивается задолго до появления клинически очевидных признаков артрита. По данным биопсии синовиальной оболочки суставов признаки хронического синовиита выявляются уже в самом начале болезни даже в клинически не пораженных суставах. Доказано, что предотвращение структурных повреждений на ранних стадиях заболевания способствует сохранению функциональной активности пациентов в долговременной перспективе [Jonsson T. et al., 1995; McGonagle D. et al., 2006].

Однако вопрос ранней диагностики РА всерьёз вызывает затруднения у специалистов-ревматологов. Основная причина подобных трудностей – недостаточная диагностическая значимость признаков, обнаруживаемых при физикальном осмотре, рутинных лабораторных и инструментальных исследованиях.



Основным субстратом ревматических заболеваний, в частности РА, является соединительная ткань, широко представленная в организме человека. Эластин - белковый компонент соединительной ткани, ко­торый составляет основу эластических волокон, представляющих значительную часть массы сухого вещества многих органов: это и связочный аппарат, хрящевая ткань, синовиальная оболочка, легкие, крупные кровеносные сосуды, такие как аорта, клапанный аппарат сердца, кожа.

Обмен соединительнотканных структур находится в динамическом равновесии. Так, известно, что эластин, нуждающийся в обновлении, и в норме подвергается деградации под воздействием эластазы. Изменения непосредственно в самой системе «эластин-эластаза» могут быть обусловлены как чрезмерной активностью протеолитического фермента (и тогда будет наблюдаться повышенная деструкция необходимого организму эластина), так и снижением его активности (с патологическим старением эластина, перестающего осуществлять свои функции).

Согласно современным предположениям, поражение соединительной ткани при ревматоидном артрите является следствием развивающихся иммунопатологических нарушений. Нормальный обмен эластина сопровождается образованием аутоантител к эластину и эластазе, что также, по-видимому, влияет на функционирование эластических структур соединительной ткани. При ревматических заболеваниях, возможно, включаются механизмы гиперпродукции аутоантител. Это ведет к нарушению физиологического соотношения эластина и эластазы, поскольку антитела обладают способностью блокировать ферментативную активность веществ, а также непосредственно разрушать субстрат фермента.

Надо отметить, что имеющиеся в литературе сведения по изучению аутоантител к эластину [Bako G. et al., 1987] и эластазе [Daskalova M. et al., 1997] у больных РА не систематизированы и единичны. В то же время имеются данные о более высокой чувствительности метода иммуноферментного анализа (ИФА) с применением иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов (ИГАП). В связи с этим представляется актуальным комплексное исследование у больных РА выше указанных антител с исследованием корреляций между их уровнями, что позволит выяснить некоторые детали патогенеза данного заболевания, будет способствовать более точной оценке активности патологического процесса и выработке усовершенствованных способов диагностики РА и дифферен­циальной диагностики заболеваний суставов.

Цель исследования

Целью исследования является уточнение некоторых звеньев патогенеза, усовершенствование иммунологической диагностики, дифференциальной диагностики при ревматоидном артрите с помощью изучения антителообразования к эластину и эластазе.

Основные задачи исследования

  1. Получить иммобилизированные формы эластина и эластазы, изучить их физико-химические свойства.
  2. Отработать условия и технику проведения иммуноферментного анализа с использованием ИГАП на основе эластина и эластазы для определения соответствующих аутоантител.
  3. Изучить распространенность и концентрацию антител к эластину и эластазе в сыворотке крови здоровых людей и определить границы нормы этих показателей.
  4. На основе отработанных методик изучить содержание аутоантител к эластину и эластазе в сыворотке крови больных РА в зависимости от активности, наличия внесуставных проявлений.
  5. Исследовать взаимосвязь процессов аутоантителогенеза к эластину и эластазе у больных РА.
  6. Изучить содержание аутоантител к эластину и эластазе в сыворотке крови больных контрольной группы (больных подагрическим, псориатическим, реактивным артритами, анкилозирующим спондилитом) и количественно оценить эффективность изучения антител к эластину и эластазе для дифференциальной диагностики РА от других ревматических заболеваний.

Научная новизна

Впервые для иммунодиагностики воспалительных заболеваний суставов разработаны и применены иммобилизированные формы эластина и эластазы, подобраны оптимальные концентрации антигенов и определены условия проведения иммуноферментного анализа с использованием ИГАП.

В сыворотке крови больных РА обнаружены антитела к эластину и эластазе. Показано, что их уровень достоверно отличается от содержания данных антител в сыворотке крови здоровых лиц и больных с другими ревматическими заболеваниями, протекающими с выраженным суставным синдромом (подагрический артрит, псориатический артрит, реактивный артрит, анкилозирующий спондилит). Проанализирована зависимость указанных показателей от активности ревматоидного процесса, наличия внесуставных проявлений заболевания.

Впервые при РА изучены корреляционные связи между уровнями аутоантител к эластину и эластазе, а также показана связь повышения антител с активностью патологического процесса, клиническими особенностями заболевания.

Практическое значение

Разработан доступный для применения в клинических лабораториях способ определения уровня антител к эластину и эластазе, представляющий собой модификацию иммуноферментного анализа с использованием иммобилизированных в магнитоуправляемые гранулы белков в качестве антигенов.

Исследования показали достоверные различия в содержании антител к эластину и эластазе у больных РА и больных с различными воспалительными заболеваниями суставов (подагрический артрит, псориатический артрит, реактивный артрит, анкилозирующий спондилит), что позволяет использовать данные тесты вместе с другими клинико-лабораторными показателями для дифференциальной диагностики этих заболеваний.





Уточнена взаимосвязь клинических проявлений РА, в частности поражений сосудов, сердца, крови и синовиальной оболочки, с наличием изучаемых антител.

Основные положения, выносимые на защиту

  1. Содержание антител к эластину и эластазе в сыворотке крови зависит от активности, наличия внесуставных проявлений РА.
  2. Определение уровня аутоантител может использоваться для диагностики активности патологического процесса при РА и дифференциальной диагностики с другими ревматическими заболеваниями, сопровождающимися суставным синдромом.
  3. Наиболее ценным с диагностической точки зрения является определение иммуноферментным методом с помощью иммобилизированных антигенных препаратов в сыворотке крови антител к эластазе.

Внедрение в практику

Методы определения антител к эластину и эластазе иммуноферментным методом с помощью иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов с магнитными свойствами внедрены в практику работы муниципального учреждения здравоохранения «Городская клиническая больница скорой медицинской помощи №25» города Волгограда.





Публикации

По теме диссертации опубликовано 18 печатных работ,в том числе 1 – в издании, рецензируемом ВАК.

Апробация работы

Основные положения диссертации были представлены на итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых Волгоградского государственного медицинского университета (2007-2010 гг.), II Международном молодежном медицинском конгрессе «Санкт-Петербургские научные чтения-2007» (Санкт-Петербург, 2007), XV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2008), Национальном конгрессе терапевтов (Москва, 2008), Международной конференции «Физиология и патология иммунной системы», IV Международной конференции по иммунотерапии (Москва, 2008), симпозиуме EULAR (Копенгаген, Дания, 2009), Конференции «Актуальные проблемы современной кардиологии и терапии» (Киров, 2009). Первичная экспертиза диссертации была проведена на совместном заседании Учреждения Российской академии медицинских наук НИИ Клинической и экспериментальной ревматологии РАМН и кафедры госпитальной терапии ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет»

09 декабря 2010 года (протокол № 7).

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 155 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав с описанием использованных материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, их обсуждений, выводов, практических рекомендаций и приложений. Работа иллюстрирована 22 таблицами, 10 рисунками, 6 схемами, 5 выписками из истории болезни. Указатель литературы включает 199 источников, в том числе 58 на русском языке и 141 на иностранном.

Методы исследования

Исследование проводилось в соответствии с принципами Хельсинкской декларации Международной медицинской ассоциа­ции (1996 г.). Соблюдение требований биоэтики подтверждено результатами экспертизы Регионального этического комитета.

Для выполнения поставленных задач были сформированы группа больных с верифицированным РА, а также контрольная группа. В состав последней были включены пациенты с ревмати­ческими заболеваниями, которые, по общему мнению специа­листов, наиболее часто вызывают затруднения при дифферен­циальной диагностике с РА: псориатический, подагрический, реактивный артрит, анкилозирующий спондилит [ Насонова В.А., Бунчук Н.В., 1997]. Отбор в обе группы производили среди пациентов, находившихся на стационарном лечении с октября 2007 года по май 2008 года в отделении ревма­тологии МУЗ «Городской клинической больницы скорой медицинской помощи №25» г. Волгограда.

Верификацию диагнозов производили с помощью общеприня­тых критериев: для ревматоидного артрита – с использованием классификации РА Ассоциации ревматологов России (АРР) [Насонов Е. Л., 2008], диагностических критериев Международной антиревматической лиги [Насонов Е. Л., 2010], а также Американской коллегии ревматологов (АКР) [Arnett F.C. et al., 1987]; для псориатического артрита – по критериям H. Mathies (1974), дополненным сотрудниками НИИ ревматологии АМН СССР [Агабабова Э. Р., 1989] а также критериев CASPAR (2006) [Насонов Е. Л., 2008]; для подагрического артрита – по критериям, рекомендованным международными симпозимумами по популяционным исследованиям в Риме (1961), Нью-Йорке (1966), усовершенствованным работами сотрудников НИИ ревматологии АМН СССР [Насонова В. А., Астапенко М. Г., 1989], а также по критериям, рекомендованным ВОЗ в 2000 году [Насонов Е. Л., 2008]; для реактивного артрита – по критериям, разработанным на 4-ом Международном рабочем совещании по реактивным артритам [Берлин, 1999], а также российские критерии (2004) [Насонов Е. Л., 2008]; для анкилозирующего спондилита – по модифицированным критериям, предложенным на международном Симпозиуме в Риме (1961) и Нью-Йорке (1969), а также по критериям НИИ ревматологии РАМН (1997) [Насонов Е. Л., 2008].

Критерии включения для больных РА



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.