WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 |

Прогнозирование первичной адентии с применением молекулярно-генетического анализа

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

ЧУЙКИН Олег Сергеевич

Прогнозирование первичной адентии с применением молекулярно-генетического анализа

14.00.21 – «Стоматология»

03.00.15 – «Генетика»

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени

кандидата медицинских наук

Москва - 2009

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Московском государственном медико-стоматологическом университете Росздрава» и в ГОУ ВПО «Башкирском государственном медицинском университете Росздрава»

Научные руководители:

член-корреспондент РАМН,

доктор медицинских наук,

профессор Леонид Семенович Персин;

доктор медицинских наук,

профессор Татьяна Викторовна Викторова

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук,

профессор Марина Яковлевна Алимова;

заслуженный деятель науки РФ,

доктор биологических наук,

профессор Эльза Камилевна Хуснутдинова

Ведущая организация: ФГУ «Центральный научно-исследовательский институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Росмедтехнологий» (ЦНИИС и ЧЛХ),

Защита состоится «___»_________2009 г. в « » часов на заседании диссертационного совета Д 208.041.07 при ГОУ ВПО «Московском государственном медико-стоматологическом университете Росздрава» по адресу: 127473, Москва, ул. Делегатская д.20/1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке гоу впо «Московского государственного медико-стоматологического университета Росздрава» по адресу: 127206, Москва, ул. Вучетича, д. 10а.

Автореферат разослан «____» ________2009 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета,

кандидат медицинских наук, доцент О.П. Дашкова

Актуальность проблемы

Зубочелюстные аномалии занимают одно из первых мест в структуре стоматологических заболеваний у детей. В настоящее время количество зубочелюстных аномалий возрастает. По данным эпидемиологического обследования в Российской Федерации, они были выявлены у 60% обследованных детей в возрасте до 14 лет (Хорошилкина Ф.Я., Персин Л.С., 2005).

Первичная адентия относится к одной из наиболее тяжелых форм зубочелюстных аномалий. Распространенность первичной адентии постоянных зубов у детей варьирует от 2 до 5%, в зависимости от изучаемой патологии (Евневич Е.П., 2000; Максимов Н.В., Панкратова Н.В.,2007; МcKeon H.F., Robinson D.L., 2002; McNamara, Foley T., 2006).

При частичной первичной адентии нарушения в челюстно-лицевой области нарастают с увеличением количества отсутствующих зубов. Страдает внешний вид пациента, нарушаются функции жевания, откусывания пищи, речеобразования. Появляются анатомические нарушения: диастема, тремы, наклоны и смещения зубов в сторону дефекта, зубо-альвеолярное удлинение на противоположной челюсти и др.

Актуальной проблемой является прогнозирование риска развития первичной адентии с целью разработки методов эффективной профилактики данной патологии на этапе планирования и первом триместре беременности.

Первичная адентия может развиваться при хромосомных нарушениях, а также под влиянием тератогенных воздействий. В последнем случае первичная адентия рассматривается как многофакторная патология, обусловленная влиянием комплекса эндогенных и экзогенных факторов.

Причиной увеличения распространенности зубочелюстных аномалий у детей является существование устойчивых факторов, способствующих формированию этой патологии и поддерживающих ее стабильный уровень у населения (Образцов Ю.А., 2004; Смердина А.Н., 2001; Сунцов В.Г., 2005).

Большинство факторов риска возникновения зубочелюстных аномалий являются управляемыми, т.е. своевременное устранение или ослабление их действия предупреждает формирование аномалий (Зуева Л.П., Яфаев Р.Х., 2005).

Для реализации тератогенного эффекта необходимо воздействие комплекса неблагоприятных факторов внешней среды на генетически восприимчивый организм (Тутуева Т.А. 1991; Шайхутдинова Д.И., 2007).

Взаимосвязь между неблагоприятными экологическим факторами окружающей среды, генетическими факторами и зубочелюстными аномалиями, в частности первичной адентией, в настоящее время не достаточно изучена. Участие генов детоксикации ксенобиотиков в процессе метаболизма в организме тератогенов указывает на целесообразность применения молекулярно-генетического анализа для поиска возможных генетических маркеров среди полиморфных вариантов данных генетических систем, которые можно было бы использовать в прогнозировании риска развития первичной адентии на этапе планирования и первом триместре беременности.

Цель работы:

Прогнозирование первичной адентии с применением молекулярно-генетического анализа в районе с неблагоприятными экологическими факторами окружающей среды.

Задачи исследования:

  1. Провести сравнительную оценку распространенности зубочелюстных аномалий и первичной адентии у детей в контрольном районе и районе с неблагоприятными экологическими факторами окружающей среды г. Уфы.
  2. Изучить структуру первичной адентии у детей в районе с неблагоприятными экологическими факторами.
  3. Провести анализ взаимосвязи частоты развития первичной адентии с уровнем загрязнения окружающей среды в районе с неблагоприятными экологическими факторами.
  4. Изучить распределение частот аллелей и генотипов полиморфных локусов генов детоксикации ксенобиотиков (монооксидазной системы и антиоксидантной защиты) у детей с первичной адентией и в контрольной группе.
  5. Провести сравнительный анализ полиморфных вариантов гена метилентетрагидрофолатредуктазы у детей с первичной адентией и в контрольной группе.
  6. Разработать и внедрить способ прогнозирования риска развития первичной адентии на этапе планирования и первом триместре беременности с применением молекулярно-генетического анализа.

Научная новизна.



    1. Впервые проведена сравнительная оценка распространенности, структуры зубочелюстных аномалий и первичной адентии у детей, проживающих в районе с неблагоприятными экологическими факторами и контрольном районе.
    2. Впервые выявлена взаимосвязь факторов риска - загрязнения промышленными выбросами (экотоксикантами) окружающей среды с высоким уровнем распространенности первичной адентии у детей, проживающих в районе с неблагоприятными экологическими факторами.
    3. Впервые в Республике Башкортостан создана коллекция образцов ДНК больных с первичной адентией.
    4. Впервые установлена ассоциация полиморфных вариантов генов детоксикации ксенобиотиков с развитием первичной адентии.
    5. Впервые разработан и внедрен способ прогнозирования риска развития первичной адентии на этапе планирования и в первом триместре беременности с применением молекулярно-генетического анализа (подана заявка на изобретение).

Практическая значимость работы.

  1. Полученные данные эпидемиологического исследования распространенности, структуры зубочелюстных аномалий и первичной адентии в районе с неблагоприятными экологическими факторами могут быть использованы в практическом здравоохранении при разработке лечебно-профилактических программ.
  2. Прогнозирование риска развития первичной адентии с применением молекулярно-генетического анализа на этапе планирования и в первом триместре беременности позволит своевременно проводить лечебно-профилактические мероприятия.
  3. Данные исследования могут быть использованы в учебном процессе: при обучении студентов на стоматологическом, педиатрическом и лечебном факультетах медицинских Вузов; в последипломном усовершенствовании врачей стоматологов, педиатров, акушеров-гинекологов и генетиков.

Положения, выносимые на защиту:

  1. У детей, проживающих в районе с неблагоприятными экологическими факторами, наблюдается высокий уровень распространенности зубочелюстных аномалий и первичной адентии.
  2. В структуре первичной адентии у детей в районе с неблагоприятными экологическими факторами чаще встречается отсутствие двух зубов, преобладает отсутствие зубов на верхней челюсти во фронтальном отделе.
  3. Имеется взаимосвязь между уровнем загрязнения окружающей среды промышленными выбросами и частотой развития первичной адентии у детей, проживающих в районе с неблагоприятными экологическими факторами.
  4. Маркерами повышенного риска развития первичной адентии являются мутантные варианты генов цитохромов.
  5. Риск развития первичной адентии ассоциирован с делециями генов GSTM1 и GSTT1.
  6. Применение молекулярно-генетического анализа позволяет повысить эффективность прогнозирования риска развития первичной адентии на этапе планирования и в первом триместре беременности в условиях воздействия неблагоприятных экологических факторов окружающей среды.

Апробация результатов исследования

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на 67-й Республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан «Вопросы теоретической и практической медицины (Уфа, 2002); на Республиканской конференции стоматологов «Профилактика и лечение стоматологических заболеваний у детей», «Актуальные проблемы стоматологии» (Уфа, 2006); на Всероссийском конгрессе и Республиканской конференции стоматологов РБ «Внедрение новых технологий при лечении стоматологических заболеваний» (Уфа, 2007); на IX ежегодном научном форуме «Стоматология 2007», посвященном 45-летию ЦНИИС (Москва, 2007); на VI международном симпозиуме «Актуальные вопросы черепно – челюстно – лицевой хирургии и нейропатологии» (Москва, 2008); на Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы педиатрии» (Уфа, 2008); на XII съезде ортодонтов России «Диагностика и лечение мезиальной окклюзии зубных рядов» (Москва, 2009); на ХIII Международной научной конференции «Здоровье семьи – ХХI век» (Хургада, 2009); на Республиканской конференции молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Медицинская наука - 2009» (Уфа, 2009). Апробация работы проведена на межкафедральном заседании стоматологического факультета совместно с кафедрой биологии и генетики, Проблемной комиссией по стоматологии ГОУ ВПО «Башкирского государственного медицинского университета Росздрава» и институтом биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН (Уфа, 2009). Работа была обсуждена на заседании кафедры ортодонтии и детского протезирования ГОУ ВПО «МГМСУ Росздрава».





Внедрение результатов исследования в практику.

Результаты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс на стоматологическом факультете ГОУ ВПО «Башкирского государственного медицинского университета Росздрава»; ГОУ ВПО «Самарского государственного медицинского университета Росздрава»; ГОУ ВПО «Новосибирского государственного медицинского университета Росздрава»; ГОУ ВПО «Казанского государственного медицинского университета Росздрава»; ГОУ ВПО «Пермской государственной медицинской академии Росздрава».

Результаты работы внедрены в практическое здравоохранение путём издания методической рекомендации «Прогнозирование первичной адентии с применением молекулярно-генетического анализа», утвержденной Министерством здравоохранения Республики Башкортостан.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 16 научных работ, из них - 4 в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ и 1 монография.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 126 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения и выводов. Цифровой материал представлен в 15 таблицах, работа иллюстрирована 24 рисунками, список литературы содержит 163 ссылки, включающих 106 источников отечественной и 57 источников зарубежной литературы.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для решения поставленных задач нами было проведено эпидемиологическое стоматологическое обследование детей дошкольного и школьного возраста города Уфы. Основным документальным материалом о состоянии окружающей среды являлся «Государственный доклад о состоянии окружающей природной среды в Республике Башкортостан» (РБ) Государственного Комитета Роспотребнадзора по охране окружающей среды за 2001-2008 годы.

Районы южной части города (Кировский и Дёмский), где отсутствуют предприятия промышленного загрязнения, условно рассматривали как контрольный район. Районы, располагающиеся в северной части города в непосредственной близости к промышленным предприятиям (Орджоникидзевский и Калининский) условно были определены как район с неблагоприятными экологическими факторами (НЭФ). Это соответствовало данным экологического мониторинга.

Методы стоматологического обследования.

С целью выявления различия распространенности зубочелюстных аномалий (ЗЧА) и первичной адентии (ПА) в городе Уфе, с учетом экологических факторов, нами было проведено эпидемиологическое стоматологическое обследование 1219 детей в возрасте от 6-ти до 16 – ти лет, проживающих в городе Уфе. Контрольный район – 607 детей и район с неблагоприятными экологическими факторами - 612 детей.

Эпидемиологическое стоматологическое обследование проводили в детских дошкольных и школьных учреждениях города Уфы с помощью стандартного набора инструментов. Данные обследования вносили в карту стоматологического обследования, разработанную на кафедре стоматологии детского возраста ГОУ ВПО «Башкирского государственного медицинского университета Росздрава».

Аномалии зубов, зубных рядов, челюстей и окклюзии рассматривали по классификации кафедры ортодонтии и детского протезирования Московского государственного медико-стоматологического университета (1990).

Рентгенологический метод исследования

С целью выявления первичной адентии отдельных зубов или их групп у обратившихся за ортодонтической помощью, изучены 48 внутриротовых рентгенограмм альвеолярных отростков и 267 ортопантомограмм челюстей.

Молекулярно-генетические методы исследования

Материалом для молекулярно-генетического исследования служили образцы ДНК, выделенные из лимфоцитов периферической венозной крови 60 больных с адентией и 240 лиц контрольной группы, подобранных с учетом половой и этнической принадлежности.

Для выделения ДНК использовался стандартный метод фенольно-хлороформной экстракции (Mathew C.C. 1984).

Анализ полиморфных локусов генов CYP1А1, GSTM1, GSTТ1 и MTHFR проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). ПЦР проводили на амплификаторе «Терцик» («ДНК-Технология»).

Полиморфизм генов CYP1A1 и MTHFR исследовали методом ПДРФ-анализа (полиморфизм длин рестрикционных фрагментов).

Для изучения частоты делеции генов GSTМ1 и GSTT1 применяли метод ПЦР.

Проведение электрофореза и визуализация результатов

Амплифицированные фрагменты ДНК разделяли электрофоретически в 7-8% полиакриламидном неденатурированном геле.

Статистический анализ

Результаты всех проведенных исследований обрабатывали с помощью общепринятых математических методов вариационной статистики.

Статистический анализ полученных данных проводился на персональном компьютере с использованием стандартной программы «Microsoft Excel 2000», «Microsoft Access 2000» и пакетов статистических программ: «Statistica v.5.0», RxC-статистика (Roff D.F., Bentzen P., 1989)..

Для оценки значимости различия статистических коэффициентов с помощью средних ошибок вычислялся критерий Стьюдента. Во всех случаях определялась средняя арифметическая величина (М), среднеквадратичное отклонение (), стандартная ошибка средней (м) и критерий достоверности (t). По критерию достоверности с помощью таблицы Стьюдента учитывалось число степеней свободы, определялась вероятность изучаемого признака (Р). Различия принимались за достоверные при Р<0,05.



Pages:   || 2 | 3 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.