WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 7 |

Молекулярно-генетические аспекты патогенеза венозного тромбоэмболизма

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

УДК 616.155.2:616-005.7:616-092:612.114

КАПУСТИН

Сергей Игоревич

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПАТОГЕНЕЗА ВЕНОЗНОГО ТРОМБОЭМБОЛИЗМА

14.00.29 – гематология и переливание крови

03.00.04 – биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

Санкт-Петербург – 2007

Работа выполнена в ФГУ “Российский ордена Трудового Красного Знамени, ордена Дружбы народов научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию”



Научные консультанты:

доктор медицинских наук, профессор Михаил Николаевич Блинов

доктор медицинских наук, профессор Людмила Петровна Папаян



Официальные оппоненты:

член-корреспондент РАМН, заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Владислав Сергеевич Баранов

доктор биологических наук Наталья Николаевна Зыбина

доктор медицинских наук, профессор Александр Давидович Макацария


Ведущая организация – Санкт-Петербургский Государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова



Защита состоится __________________ 2007 г. в ___________ часов

на заседании диссертационного совета Д 208.074.01 при Российском НИИ гематологии и трансфузиологии Росздрава по адресу:

191024, г. Санкт-Петербург, ул. 2-я Советская, д.16.


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Российского НИИ гематологии и трансфузиологии


Автореферат разослан ____________________ 2007 г.



Ученый секретарь специализированного совета

доктор медицинских наук Т.В. Глазанова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

Несмотря на значительные успехи современной медицины, тромбоэмболические заболевания (ТЭЗ) по-прежнему представляют глобальную медико-социальную проблему, являясь основной причиной смертности и инвалидизации в индустриально развитых странах (Балуда В.П. и соавт., 1999.; Бокарев И.Н., 2000). Частота возникновения венозного тромбоэмболизма (ВТ) в общей популяции составляет 1-2 случая на тысячу населения ежегодно, при этом более 90% тромбозов локализуется в системе нижней полой вены (Silverstein M.D. et al., 1998; Heit J.A. et al., 2001). Тромбозы глубоких вен нижних конечностей (ТГВНК) являются основной причиной развития различных форм тромбоэмболии легочной артерии (ТЭЛА) – от асимптоматических до фатальных (Савельев В.С., Матюшенко А.А., 1999). Особую проблему представляют рецидивирующие формы ВТ. В то же время, более половины тромботических эпизодов в венозном русле протекают бессимптомно и обнаруживаются впоследствии при развитии таких осложнений, как ТЭЛА, хроническая венозная недостаточность и, к сожалению, достаточно часто на аутопсии (Planes A. et al., 1988; Gathof B.S. et al., 2004). Фатальная ТЭЛА нередко является первым и единственным проявлением ВТ и занимает третье место в общей структуре причин внезапной смерти (Кириенко А.И. и соавт., 2003; Heit J.A. et al., 2001).

Ключевое место в современной концепции патогенеза ВТ занимает понятие “фактор риска” (ФР), обозначающее любое состояние, между наличием которого и повышенной встречаемостью заболевания существует либо предполагается причинно-следственная связь (Rosendaal F.R., 1999). Установлен целый ряд ставших уже классическими факторов риска ВТ (Rosendaal F.R., 1999; Samama M.M. et al., 2003). Наряду с ними, важное место в его патогенезе отводится феномену тромбофилии, или повышенной склонности индивида к тромбозу (Баркаган З.С., 1996). Исследования последних лет существенно расширили наши представления о молекулярных механизмах формирования тромбофилических состояний (Патрушев Л.И., 1999; Макацария А.Д., Бицадзе В.О., 2001; De Stefano V et al., 2002). Во многом это объясняется успехами в изучении такой фундаментальной составляющей эндогенного риска, как генетическая предрасположенность.

Интерес к изучению наследственной тромбофилии (НТ) возрос в связи с открытием около 10 лет назад мутаций в генах факторов II и V свертывания крови, которые считаются наиболее частыми причинами генетической предрасположенности к ВТ (Bertina R.M. et al., 1994; Poort S.R. et al., 1996). Однако, несмотря на общепризнанное мнение о протромботической роли указанных аномалий, по-прежнему существует множество вопросов относительно их участия в патогенезе различных клинических проявлений ВТ и целесообразности диагностики этих мутаций в практических целях. Сложившаяся ситуация во многом объясняется многофакторной природой ВТ и сложным характером взаимодействия генетических и экзогенных ФР, лежащих в основе или провоцирующих развитие патологических сдвигов в системе гемостаза (Samama M.M. et al., 2003). Эпидемиологические исследования указывают также на возможность неодинакового вклада тех или иных факторов (в том числе, генетических) в патогенез ВТ у представителей различных популяционных групп (Rosendaal F.R., 1999).



Необходимость использования принципиально новых подходов при изучении основ генетической предрасположенности к тромбозу диктуется существующей на сегодняшний день концепцией о полигенном характере НТ, которая постулирует наличие в подавляющем большинстве случаев ТЭЗ не одного, а нескольких генетических вариантов, независимо или синергично модифицирующих риск развития заболевания (Zoller B. et al., 1999). В этой связи, особый интерес уделяется явлению аллельного полиморфизма, которое присуще большинству генов человека (Баранов В.С. и соавт., 2000), в том числе, тем, продукты которых вовлечены в регуляцию физиологического тока крови. К настоящему времени выявлено несколько десятков генетических вариантов, носительство которых ассоциировано с развитием протромботических сдвигов в системе гемостаза и/или риском ВТ (Lane D.A., Grant P.J., 2000; Sykes T.C.F. et al., 2000; Franco R.F., Reitsma P.H., 2001). Большинство из них кодирует компоненты плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза, либо предрасполагает к развитию состояний, вовлеченных в патогенез эндотелиальной дисфункции (гипергомоцистеинемия, дислипидемия, артериальная гипертензия и др.).

Несмотря на интенсивный поиск новых генетических детерминант НТ, данные о роли большей части полиморфизмов ДНК в формировании индивидуальной предрасположенности к тем или иным тромботическим проявлениям остаются весьма противоречивыми. Практически отсутствуют работы, посвященные изучению распространенности уже известных и потенциальных факторов риска ВТ в зависимости от пола пациентов, возраста, в котором произошла клиническая манифестация заболевания, наличия классических ФР и т.д. К сожалению, весьма редкими остаются публикации, в которых проводится анализ “ген-генных взаимодействий” полиморфных генетических вариантов, способных влиять на риск развития ВТ. Наконец, существует целый ряд нерешенных вопросов относительно целесообразности диагностики определенных полиморфизмов ДНК в клинической практике, что в значительной мере объясняется недостаточным количеством исследований, направленных на установление коррелятивных связей между особенностями клинического течения тромботического процесса и наличием определенных маркеров в генотипе пациента.

Это обусловило интерес к изучению роли некоторых генетических вариантов, способных оказывать влияние на функциональную активность системы гемостаза, в патогенезе ВТ у жителей Северо-Западного региона России и позволило сформулировать цель и задачи исследования.

Цель исследования

Установить роль аллельного полиморфизма некоторых генов, вовлеченных в регуляцию функциональной активности гемостаза, в патогенезе наиболее распространенных клинических форм венозного тромбоэмболизма для совершенствования критериев при формировании групп повышенного риска и прогнозировании течения данной патологии.

Задачи исследования

  1. Изучить характер распределения генетических полиморфизмов, ассоциированных с дисфункцией плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза, а также сосудистой стенки, у больных с ВТ.
  2. Провести анализ “ген-генных взаимодействий” в группе больных с ВТ и выявить генотипические сочетания, ассоциированные с риском развития данной патологии.
  3. Исследовать распределение генетических полиморфизмов и характер “ген-генных взаимодействий” в зависимости от пола пациентов и возраста, в котором произошел дебют ВТ.
  4. Выявить аллельные варианты и их сочетания, характерные для пациентов с рецидивирующим течением ТГВНК.
  5. Выявить аллельные варианты и их сочетания, характерные для пациентов с ТГВНК, осложненным ТЭЛА.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Аллельный полиморфизм генов, вовлеченных в регуляцию функциональной активности гемостаза, составляет основу генетической предрасположенности к ВТ и является одним из важнейших факторов, определяющих характер его клинических проявлений.

2. Наиболее значимыми генетическими факторами риска ВТ у жителей Северо-Западного региона России являются мутации “1691G/А” в гене фактора V и “20210G/A” в гене фактора II, что согласуется с данными для других популяционных групп европеоидной расы. Неодинаковый характер “ген-генных взаимодействий” с аллельными вариантами, вовлеченными в регуляцию функциональной активности гемостаза, свидетельствует о различии патогенетических механизмов возникновения ВТ и особенностей его клинического проявления у носителей мутаций в генах факторов II и V.

3. Основу полигенной предрасположенности к ВТ составляют комбинации аллельных вариантов генов, ассоциированных с дисфункцией сосудистой стенки и развитием протромботических сдвигов в системе гемостаза. Увеличение спектра анализируемых ДНК-полиморфизмов и анализ их “ген-генных взаимодействий” позволяет установить причину тромбофилического статуса более чем у половины больных с ВТ.

4. Комплексный молекулярно-генетический анализ полиморфизмов, ассоциированных с дисфункцией гемостаза, может быть использован для прогнозирования рецидивирующего течения ТГВНК и оценки риска возникновения ТЭЛА. Генетически обусловленная склонность к повышенной активации тромбоцитарного звена гемостаза является фактором риска развития ТЭЛА у пациентов с ТГВНК.





Научная новизна

Впервые на большом клиническом материале проведен комплексный молекулярно-генетический анализ ДНК-полиморфизмов, ассоциированных с дисфункцией плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза, а также сосудистой стенки, у жителей Северо-Западного региона России, перенесших эпизод(ы) наиболее распространенных проявлений венозного тромбоза – ТГВНК или/и ТЭЛА. Получены доказательства полигенной природы предрасположенности к ВТ, позволяющие обосновать необходимость расширения спектра анализируемых ДНК-полиморфизмов при установлении причин наследственных тромбофилических состояний.

Показана существенная роль полиморфизмов, ассоциированных с дисфункцией тромбоцитарного звена гемостаза, а также сосудистой стенки, в возникновении ВТ и некоторых особенностях его течения, в том числе, и у носителей мутаций в генах факторов II и V.

Впервые установлена роль полиморфизма гена аполипопротеина Е (ApoE) в патогенезе ВТ. Показано, что частота встречаемости (ЧВ) генотипа “ApoE E2/E3” у больных с ВТ существенно ниже, чем в группе здоровых лиц, что позволяет рассматривать данный генетический вариант в качестве протективного фактора. Среди пациентов с мутацией в гене фактора II или/и V увеличена доля лиц, не содержащих в генотипе аллеля “ApoE E3”, а сочетание аллеля “ApoE E4” с мутацией в гене протромбина является существенным фактором риска развития ТЭЛА как осложнения ТГВНК.

Анализ распределения генетических полиморфизмов у больных с ВТ в зависимости от пола пациентов и возраста, в котором произошел дебют заболевания, выявил значительное увеличение доли носителей аллеля “677Т” гена метилентетрагидрофолат редуктазы (MTHFR) в группе женщин, впервые перенесших ВТ в возрасте старше 45 лет. Показано, что генотип “1565CC” гликопротеина (Gp) IIIa является самостоятельным фактором риска ВТ у женщин, особенно, в молодом возрасте. Выявлено преобладание носителей мутации FV Leiden в группе пациентов с дебютом ВТ в возрасте 45 лет и старше; для лиц, перенесших эпизод(ы) ВТ в молодом возрасте, характерно увеличение ЧВ аллеля “1166C” гена рецептора ангиотензина II первого типа (ATGR1), особенно, в гомозиготной форме.

Впервые проанализирован характер “ген-генных взаимодействий” между изученными полиморфизмами, как в общей группе больных с ВТ, так и в зависимости от пола и возраста пациентов; выявлены генотипические сочетания, представляющие собой неизвестные ранее факторы риска данной патологии.

На основании анализа распределения изученных полиморфизмов ДНК, а также характера “ген-генных взаимодействий” между ними у больных с различными проявлениями ВТ, получены данные, свидетельствующие о целесообразности использования результатов генетического тестирования компонентов, вовлеченных в регуляцию гемостаза, в клинической практике для прогнозирования характера течения ТГВНК.

Практическая значимость

Использование молекулярно-генетического анализа изученных в работе ДНК-полиморфизмов в комплексе с существующими алгоритмами функциональной диагностики тромбофилических состояний позволит значительно повысить эффективность выявления факторов риска заболеваний, обусловленных патологией гемостаза.

Данные о распределении генотипов 16-ти компонентов, вовлеченных в регуляцию гемостаза, в популяции Северо-Западного региона России могут быть использованы в качестве референтных при изучении молекулярных основ генетической предрасположенности к ТЭЗ.

Полученные в результате исследования данные о встречаемости аллельных вариантов и их сочетаний у пациентов с различными проявлениями ВТ могут быть использованы при формировании групп повышенного риска с целью принятия своевременных профилактических мер, направленных на снижение частоты ТЭЗ в популяции.

Комплексная оценка аллельного полиморфизма генов, вовлеченных в регуляцию гемостаза, позволит прогнозировать рецидивирующее течение ТГВНК и риск возникновения ТЭЛА, что будет способствовать снижению общего уровня смертности и инвалидизации.


Апробация материалов диссертации

Основные положения диссертационной работы были представлены на Съездах Международного Общества по тромбозу и гемостазу: 15-ом (1998, Анталия, Турция), 18-ом (2001, Париж, Франция), 19-ом (2003, Бирмингем, Великобритания); на Съездах Европейской Ассоциации гематологов: 4-ом (1999, Барселона, Испания), 5-ом (2000, Бирмингем, Великобритания); на 17-ом Международном Конгрессе по тромбозу (2002, Болонья, Италия), на 3-ей Международной конференции по гипергомоцистеинемии (2003, Саарбрюкен, Германия), на 5-ой Всероссийской конференции “Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром. Проблемы лечения” (2000, Москва), на научно-практических конференциях “Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии” (2000, 2004 гг., Санкт-Петербург), на 6-ой Всероссийской конференции “Атеротромбоз и артериальная гипертензия” (2001, Москва), на научной конференции “Молекулярные механизмы типовых патологических процессов” (2003, Санкт-Петербург), на II Съезде реаниматологов и анестезиологов Северо-Запада России (2003, Архангельск).


Внедрение результатов исследования в практику



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 7 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.