WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 |

Биология условно-патогенных микроорганизмов, вызывающих кишечные инфекции

-- [ Страница 1 ] --




На правах рукописи




МИХАЙЛОВА ЛЮДМИЛА ВИКТОРОВНА




БИОЛОГИЯ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ, ВЫЗЫВАЮЩИХ

КИШЕЧНЫЕ ИНФЕКЦИИ


03.02.03 Микробиология


АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук



Волгоград 2011

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Научный руководитель: доктор медицинских наук,

профессор Крамарь

Олег Григорьевич;

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор Яковлев

Анатолий Трофимович

кандидат медицинских наук

доцент Усатова

Галина Николаевна

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Саратовский

государственный медицинский

университет».

Защита состоится «____» ___________2011 года в _____ часов на заседании диссертационного совета Д 208.008.06 по защите докторских и кандидатских диссертаций при Волгоградском государственном медицинском университете по адресу: 400131, г. Волгоград, пл. Павших борцов, д. 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» (400131, г.Волгоград, пл. Павших борцов, д. 1).

Автореферат разослан «____» _________ 2011 года.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор социологических наук,

доцент М. Д. Ковалева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность проблемы. В последнее время существенно изменилась этиологическая структура возбудителей инфекционных заболеваний, что связано с постоянной эволюцией бактерий и вовлечением в патологические процессы условно-патогенных микроорганизмов, которые в качестве комменсалов присутствуют в составе нормальной микрофлоры людей, а также регистрируются как этиопатогены при различных местных и генерализованных процессах (А.В.Валышев с соавт., 1997; О.Г.Крамарь, 1997; Э.С.Акайзин, 2000; В.М.Бондаренко с соавт., 2001, 2006; Н.В.Чемурзиева, 2008; S.Branger et al., 2005; M.G.Almeida et al., 2008; L.Lombardo, 2008; S.Rabizadeh, 2008; Р.Louis, 2009).

Обладая выраженной биологической и экологической пластичностью, эти микроорганизмы способны к широкому распространению во внешней среде и длительной персистенции в организме человека (С.В.Прозоровский с соавт., 1998; Е.В.Резников, 1999; А.Н.Ш.Мохаммед, 2006; J.Barret et al., 2003; M.Xiong et al., 2004; Т.Hayshi, 2006; J.C.Alverdy et al., 2008; Т. Kanno et al., 2009).

Условно-патогенные бактерии являются причиной многих заболеваний. Доказана их этиологическая роль в возникновении гнойно-воспалительных процессов ЛОР-органов, при пневмониях, заболеваниях мочеполовой системы, менингитах, различных септических осложнениях, глазных болезнях, полиартритах и острых кишечных инфекциях (В.М.Бондаренко с соавт., 2000, 2003; А.Ю.Миронов с соавт., 2000, 2001; Б.Я.Усвяцов с соавт., 2000; В.А.Гриценко с соавт., 2001; Д.В.Иванов с соавт., 2007; И.В.Крапивина с соавт., 2007; Е.В.Матисова, 2010; T.Kiwamoto et al., 2004; К.Endo et al., 2009). Инфекции, вызванные потенциально-патогенными микроорганизмами, имеют склонность к затяжному течению, патогенетической основой которых является персистенция возбудителя в организме хозяина (О.В.Бухарин, 1997, 1999, 2000; Е.А.Загороднева, 2002; И.В.Лиманская, 2006; С.К.Schmitt et al., 1999; Р.Enck et al., 2009; F.M.Ruemmele, 2009).

В общей структуре инфекцион­ной патологии острые кишечные инфекции (ОКИ) остаются одной из основных проблем, занимая по частоте второе место после респираторных вирусных инфекций (И.Л.Шаханина с соавт., 1999; Н.И.Нисевич с соавт., 2001; В.А.Астафьев, 2007; К.Mitsuyama, 2009). Заболеваемость ОКИ в Российской Федерации за последние годы со­ставила 414,6 - 457,9 на 100 тыс. населения и не имеет тенденции к снижению (В.Ф.Учайкин, 2004). При этом возрастает эпидемиологическая роль условно-пато­генных микроорганизмов, в том числе энтеробактерий (УПЭБ) (В.И.Покровский с соавт., 1999; Б.Л.Черкасский, 2002; Н.Ю.Жеребцова, 2006; А.Guarino et al., 2009).

Относительно участия УПМ при кишечных инфекциях мнения исследователей разноречивы, так как факт выделения патогена не всегда свидетельствует о его роли при данном заболевании (Н.В.Воротынцева с соавт, 2001; З.Г.Габидуллин с соавт., 2006; А.Р.Мавзютов с соавт., 2007). В подобных ситуациях зачастую более существенным является определение у выделенных культур факторов патогенности. Ценность этого критерия повышается при обнаружении не одного, а нескольких признаков вирулентности и, особенно, в патогенетически значимой дозе и/или уровне активности (О.В.Бухарин с соавт., 1996, 2002, 2006).



До настоящего времени остаются малоизученными вопросы частоты встречаемости и персистенции потенциально-патогенных микроорганизмов в условиях экологического прессинга крупного промышленного города.

Актуальность данной проблемы определяется ухудшением техногенной обстановки, связанной с урбанизацией, климатогеографическими и экологическими условиями обитания человека, снижающими его иммунореактивность, а также воздействующими на микроэкосистемы индивидуума (А.Ю.Миронов с соавт., 2001; Л.А.Леванова с соавт., 2002). При этом нарушения в составе кишечной микрофлоры наступают задолго до клинических симптомов и являются предвестниками определенных патологических процессов (А.А.Воробьев и соавт., 1995; В.М.Бондаренко с соавт., 2002; Н.Ю.Жеребцова с соавт., 2007).

Первыми реагируют на изменение среды обитания бактериальные сообщества, являясь точкой приложения любого экотоксиканта. При этом антропогенные факторы, влияя на представителей биоценоза, способствуют образованию гетерогенности популяции по различным биологическим признакам, усилению персистентных свойств и формированию антибиотикорезистентных штаммов (М.Ю.Чернуха с соавт., 2005; О.В.Рыбальченко с соавт., 2007; Н.Ю.Нилова, 2009; А.А.Покателов, 2009).

В связи с этим, изучение и анализ особенностей биологии и экологии УПМ остается актуальной проблемой современной микробиологии. Малоизученность и незначительное количество работ, посвященных профилактике и прогнозированию заболеваний, вызванных условно-патогенными бактериями при различных ситуациях, определяет перспективность избранной темы в теоретическом и практическом аспектах. Анализ распространенности потенциальных патогенов, роли механизмов саморегуляции в жизнедеятельности микробных популяций, связи происходящих изменений с уровнем и структурой заболеваний, вызванных УПБ, обусловили актуальность данной проблемы.

Учитывая вышеизложенное, целью работы явился анализ структуры бактериальных популяций УПМ, колонизирующих больных острыми кишечными инфекциями и обоснование влияния эколого-климатических факторов на заболеваемость ОКИ, вызванными потенциально-патогенными микроорганизмами в условиях крупного промышленного города.

Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:

  1. Изучить распространенность условно-патогенных бактерий в биоценозе здоровых людей и больных с кишечной патологией.
  2. Оценить биологические свойства и факторы, способствующие патогенности и персистенции УПМ, колонизирующих различные экосистемы в районах с неравнозначным техногенным прессингом.
  3. Установить критерии этиологической значимости потенциально-патогенных микроорганизмов в развитии острых кишечных инфекций.
  4. Определить значение климатических факторов, влияющих на сезонные колебания заболеваемости ОКИ в регионе обследования.
  5. Обосновать биокоррекцию в терапии и профилактике острых кишечных инфекций, этиологически связанных с условно-патогенной флорой.


Научная новизна

Полученные результаты дали основание представить экологию УПМ в условиях крупного промышленного города.

Установлено, что при острых кишечных инфекциях, вызванных потенциально-патогенными микроорганизмами, происходит глубокая структурная перестройка биоценоза и появление у бактерий факторов, способствующих персистенции.

Изучение биологических свойств УПМ дало основание считать, что обитание этих микробов в организме больных ОКИ является оптимальным вариантом их существования.

Определена активация персистентных свойств возбудителя, направленных на деградацию механизмов резистентности хозяина при достоверном изменении микроэкологии кишечника.

Установлена динамическая смена факторов, способствующих персистенции, при существовании условно-патогенных микроорганизмов в абиотических и биотических экосистемах.

Показана возможность использования персистентных свойств микробов в качестве информативных критериев значимости УПМ в развитии острых кишечных инфекций и биоиндикации загрязненности внешней среды.

Обосновано влияние климатических факторов, прежде всего температурного (увеличение средней дневной температуры более чем на +5,0С), на смену этиологической структуры ОКИ с увеличением значимости стафилококков при стрессовом климатоэкологическом воздействии.

Практическая значимость работы

Установлена распространенность УПМ и заболеваемость ОКИ связанными с ними в условиях крупного промышленного города.

Выявлены биологические характеристики условно-патогенных микроорганизмов, информативные при оценке этиологической значимости данных возбудителей в развитии инфекционного процесса.

Подтверждена необходимость проведения биокоррекции в комплексной терапии острых кишечных инфекций с использованием пробиотиков и кисломолочных продуктов среди населения г.Волгограда.

Предложен способ прогнозирования заболеваемости острыми кишечными инфекциями, вызванными УПМ в крупном промышленном городе в зависимости от климато-метеорологических факторов (рационализаторское предложение №31 от 15.10.10).





Материалы диссертации внедрены в практическую деятельность Управления Роспотребнадзора по Волгоградской области, ВОКИБ №1 и ВОДКИБ, а также используются в учебном процессе на кафедрах инфекционных болезней, детских инфекционных болезней и в работе кафедры микробиологии, вирусологии, иммунологии с клинической микробиологией Волгоградского государственного медицинского университета.

Положения, выносимые на защиту:

  1. Клинические штаммы УПМ, выделенные от пациентов при острой кишечной патологии, характеризуются широким спектром факторов патогенности и персистенции, а также множественной антибиотико-резистентностью, что свидетельствует об их этиологической значимости.
  2. Уровень заболеваемости кишечными инфекциями, вызванными условно-патогенной флорой, находится в прямой коррелятивной связи с эколого-климатическими особенностями региона исследования. Стрессовое воздействие температурных факторов приводит к смене этиологической структуры ОКИ с доминированием стафилококков.

Апробация работы

Материалы исследования доложены на 65-й, 66-й, 67-й конференциях молодых ученых (2007, 2008, 2009), XII Региональной конференции молодых исследователей Волгоградской области (2007), II и III Международных Пироговских научных медицинских конференциях (2007, 2008), 55-й региональной научной конференции (2008).

Диссертация обсуждена на расширенном заседании кафедры микробиологии, вирусологии, иммунологии с клинической микробиологией 10.11.2010г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 14 научных работ, в том числе 4 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК.

Структура и объем работы

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, главы описания материалов и методов исследования, 7 глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и указателя литера­туры, включающего 289 источников, в том числе 216 отечественных и 73 зарубежных. Работа изложена на 142 страницах машинописного текста, иллюстрирована 34 рисунками и 37 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования.


Для реализации поставленных задач нами проанализированы многолетние данные Роспотребнадзора г.Волгограда за 2000 – 2010 годы по колонизации условно-патогенными микроорганизмами различных групп здоровых и больных людей (867002).

Установили, что потенциальные патогены довольно часто колонизируют организм человека. По средним многолетним данным частота встречаемости УПМ в биоценозе людей составила 8,55%. Наибольший процент обнаружения данных микроорганизмов зарегистрирован у больных острыми кишечными инфекциями (32,36%), а наименьший – в группе здоровых (3,26%).

Микрофлора была изучена у 240 человек, из которых 120 были пациентами с ОКИ и находились на лечении в ВОКИБ №1, группу сравнения составили практически здоровые люди (120), постоянно проживающие в г.Волгограде. Анализу подвергнуты 2400 объектов внешней среды.

Идентифицировано 3103 штамма бактерий, обнаружено 847 культур УПМ, что в среднем составило 27,3%.

Микрофлора кишечника изучалась по методу Haenel (1973) с оценкой биоценоза по М.Э.Микельсаар (1988). Биологический субстрат засевали на дифференциально-диагностические среды. Выросшие культуры подвергали групповой, родовой и видовой идентификации.

При исследовании фекальной микрофлоры учитывали: 1) общее количество бактерий; 2) лакто- и бифидокультуры; 3) энтеробактерии; 4) стафилококки; 5) стрептококки; 6) дрожжеподобные грибы; 7) бактероиды.

Оценку кишечного микробиоценоза осуществляли согласно Отраслевому стандарту «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» (2003).

Забор материала с кожных покровов проводили по методике В.С.Крамарь с соавт. (1991). Качественный и количественный состав микрофлоры кожи оценивали, изучая биоценоз 7 биотопов (лоб, грудь, межпальцевые промежутки правой и левой рук, нижняя треть обеих голеней, промежность).

При изучении микрофлоры кожи определяли: 1) общую бактериальную обсемененность; 2) грамположительные кокки; 3) корине-бактерии; 4) дрожжеподобные грибы рода Кандида; 5) грамотрицательные микроорганизмы; 6) бациллы.

Биохимическая идентификация энтеробактерий была проведена с использованием диагностических систем: 1) системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов (СИБ) «Микроген» Н-Новгород; 2) микротест-системы для биохимической идентификации энтеробактерий (МТС-М-12Е).

Идентификацию стафилококков проводили в соответствии с приказом №691 от 28.12.89г. и методическими рекомендациями А.К.Акатова с соавт. (1998) с использованием диагностических систем: 1) пластины биохимические, дифференцирующие стафилококки (ПБДС) «Диагностические системы» Н-Новгород; 2) микротест-системы для биохимической идентификации стафилококков (МТС-С) г.Махачкала.

Количественное содержание микроорганизмов в фекалиях определяли в перерасчете на 1г посевного материала и степени его разведения, а средний показатель микробной обсемененности кожи – на 1,0см исследуемой поверхности (КОЕ/ед.суб.).

Бактериологическое обследование объектов окружающей среды проводили в соответствии с приказом Министерства здравоохранения РФ №215 от 14.04.79г., при этом учитывали общее микробное число, количество энтеробактерий в единице субстрата или см площади, в дальнейшем проводили выделение чистой культуры и ее идентификацию до вида.

Чувствительность к антибиотикам определяли дискодиффузионным методом с использованием индикаторных дисков НИЦФ (г.Санкт-Петербург).



Pages:   || 2 | 3 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.