WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 |

Распространенность стафилококков в популяции лиц, живущих в крупном промышленном городе

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Жадченко Юлия Викторовна

Распространенность стафилококков в популяции лиц, живущих в крупном промышленном городе

03.02.03 – Микробиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Волгоград 2013

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Крамарь Олег Григорьевич
Официальные оппоненты: Главный научный сотрудник ФКУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора РФ доктор медицинских наук, профессор Анатолий Васильевич Липницкий Кандидат медицинских наук, доцент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России Галина Николаевна Усатова
Ведущая организация ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Министерства Здравоохранения Российской Федерации

Защита состоится 26 марта 2013 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 208.008.06 при ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства России по адресу:400131, г. Волгоград, пл.Павших борцов, д.1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства России (400131, г. Волгоград, пл. Павших борцов,1)

Автореферат разослан «____» _________ 2013 года.

Ученый секретарь – Марина Дмитриевна Ковалева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Взаимодействие организма человека с микроорганизмами, заселяющими его открытые экосистемы – сложный и многофакторный процесс. В результате действия внешних и внутренних факторов качественный и количественный состав микробиоценозов постоянно меняется (О.В. Бухарин, 1990, 2003; В.М. Бондаренко, 2004, 2007; Б.А. Шендеров, 2002, 2003).

Общеизвестно, что в состав микрофлоры человека, кроме нормальных симбионтов, входят транзиторные виды, относящиеся к категории условно-патогенных, при этом при определенных условиях они могут переходить в разряд причинных, вызывая инфекционные процессы в различных органах и тканях (Д.Г. Дерябин, 2000, 2005; А.А. Воробьев с соавт., 2001, 2006; L. Brunetti et al., 2007). Среди последних значительная роль принадлежит стафилококкам, наиболее патогенными представителями которых считаются S.aureus. Будучи достаточно хорошо изученными, они привлекают внимание микробиологов и врачей всех специальностей (M.C. Enright et al., 2002; P. Moriellon et al., 2005; J.A. Rihn et al., 2005; T. Ferry et al., 2005).

Микроорганизмам рода Staphylococcus принадлежит одно из первых мест в возникновении внутрибольничных инфекций (В.Б Белобородов, С.Д. Митрохин С.Д., 2003, 2004). В настоящее время во всем мире отмечается усложнение эпидемиологической ситуации в связи с широким распространением в стационарах и во внебольничной среде клинических изолятов S.aureus, устойчивых к метициллину (MRSA) (Т.И. Афанасьева, 1998; Г.Г. Онищенко, 2002; А.А. Никулин, А.В. Дехнич, 2010; В.А.Cunha, 2003; Akane Kuramoto-Chikamatsu et al., 2007).

По роду своей деятельности медицинский персонал вынужден длительно находится в условиях госпитальной среды, подвергаясь воздействию факторов лечебного и диагностического процесса, что может приводить к дестабилизации иммунологической реактивности и изменению нормальной микрофлоры (В.Г. Акимкин, 2003, 2005; О.В. Ковалишена, 2005; Н.В. Медуницин, 2007; Ю.В. Захарова, 2008). Это, в свою очередь, способствует его колонизации условно-патогенными видами, в том числе S.aureus, нередко с измененными биологическими свойствами (Е.П. Ковалева, 2000, 2002; С.В. Сидоренко, 2001, 2002; Л.С. Страчунский с соавт., 2002, 2005).

Вместе с тем, изменение микробиоценозов, их качественная и количественная характеристика у работников стационаров изучены не достаточно. В этой связи совершенствование методов эпидемиологического и микробиологического мониторинга, направленных на выявление эпидемически значимых штаммов и условий, способствующих их биологической сукцессии, приобретает все более актуальное значение (В.И. Покровский с соавт., 2000; Л.П. Зуева с соавт., 2004, 2005, 2006; В.К. Ильин, 2005).

Исследования в области взаимодействия организма человека с населяющими его бактериями могут способствовать выработке новые подходов к диагностике и профилактике многих, в том числе внутрибольничных, заболеваний.

Цель исследования: разработка и обоснование критериев оценки значимости стафилококков в формировании нормальной микробной флоры здорового человека и медицинских работников; выработка рекомендаций, направленных на снижение колонизации эпидемически значимыми штаммами.



Задачи исследования

  1. Изучить нормальную микрофлору открытых биотопов и установить параметры колонизации стафилококками кожи, слизистых оболочек носовых ходов и кишечника здоровых людей.
  2. Выявить закономерности колонизации организма человека S.aureus в зависимости от состояния микробиоты хозяина и внешних экологических факторов, установить биотопы, имеющие высокое эпидемиологическое значение.
  3. Выяснить особенности формирования микрофлоры у лиц, сотрудников соматических стационаров. Оценить влияние факторов госпитальной среды на микрофлору открытых биотопов и на уровень колонизации S.aureus в зависимости от тяжести микроэкологических нарушений.
  4. Изучить фенотипические особенности золотистых стафилококков у различных категорий носителей.
  5. На основании полученных данных разработать тактику профилактических мероприятий и практические рекомендации, направленные на коррекцию микрофлоры.

Научная новизна работы

Впервые с применением критериев общего экологического подхода к оценке биоценоза определена значимость стафилококков в формировании микрофлоры открытых биотопов тела (слизистых оболочек носовых ходов, кожи и кишечника) здоровых людей, проживающих в неравнозначной экологической обстановке.

Показано, что золотистые стафилококки входят в состав резидентной микрофлоры здорового человека, колонизируя открытые биотопы в составе ассоциаций с аутохтонными симбиотическими микроорганизмами, при этом последние являются факторами, ограничивающими численность S.aureus.

Установлено, что слизистая оболочка носовых ходов здоровых людей является оптимальной экологической нишей для S.aureus. Стафилококки, колонизирующие данный биотоп, обладают выраженной гетерогенностью по биологическим признакам, которая обеспечивает им убиквитарность и интенсивные миграционные процессы.

Определены причинно-следственные связи между частотой колонизации золотистыми стафилококками и выраженностью дисбиоценотических нарушений у лиц, подверженных комплексному влиянию факторов больничной среды. Показано, что у медицинского персонала происходит формирование дисбактериоза открытых биотопов с уменьшением доминирования нормальных симбионтов и увеличением такового для условно-патогенных бактерий, в том числе S.aureus.

Показано, что влияние госпитальных факторов проявляется в обеднении фенотипического и генетического разнообразия S.aureus, что позволяет говорить о формировании высокоэпидемичных госпитальных штаммов. Золотистые стафилококки, входящие в состав микробиоты данной категории носителей, обладают высокой резистентность к антимикробным препаратам, что требует дифференцированного подхода при коррекции микроэкологических нарушений.

Научно-практическая значимость работы

Автором обоснована концептуальная модель, ориентированная на мониторинг микроэкологических нарушений у различных категорий носителей золотистых стафилококков. Полученные результаты позволят оптимизировать эпидемиологический мониторинг за эпидемически значимыми штаммами стафилококков в соматических стационарах и рекомендовать систему мероприятий, позволяющих минимизировать дисбактериозы открытых биотопов у данной категории лиц.

Положения, выносимые на защиту

  1. Золотистые стафилококки входят в состав нормальной резидентной микрофлоры здорового человека, колонизируя открытые биотопы тела. Симбиотические виды, входящие в состав бактериальных ассоциаций кожи и слизистых оболочек, являются факторами, ограничивающими численность S.aureus.
  2. Эпидемиологически значимым биотопом для S.aureus является слизистая оболочка носовых ходов. Штаммы, колонизирующие данный биотоп, обладают выраженной гетерогенностью популяции по биологическим признакам, которая обеспечивает им убиквитарность и интенсивные миграционные процессы.
  3. Заселению стафилококками открытых биотопов предшествует нарушение качественного и количественного состава микрофлоры. Интенсивность колонизации золотистыми стафилококками имеет высокую корреляцию со степенью выраженности дибиотических нарушений. С максимальной интенсивностью данные процессы протекают у лиц, проживающих в экологически неблагоприятной обстановке.
  4. Медицинские работники составляют группу высокого риска по развитию множественных сочетанных микроэкологических нарушений. Микробный статус открытых биотопов медицинского персонала соматического стационара подвергается воздействию разнообразных факторов госпитальной среды, что проявляется снижением значимости нормальных симбионтов и увеличением доминирования условно-патогенных бактерий, высокой частотой микроэкологических нарушений и высоким уровнем бактерионосительства S.aureus.
  5. Микрофлора слизистых оболочек, кожи, кишечника медицинского персонала характеризуется преобладанием антибиотикорезистентных и высоко вирулентных S.aureus, что позволяет говорить о колонизации штаммами высокой эпидемической значимости.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на XIII региональной конференции молодых исследователей Волгоградской области (Волгоград, 2008); 55-ой юбилейной региональной конференции профессорско-преподавательского коллектива Волгоградского государственного медицинского университета «Современная инновационная медицина-населению Волгоградской области» (Волгоград, 2008); 67-ой, 69-ой, 70-ой научно-практических конференциях молодых ученых и студентов (Волгоград, 2009, 2011, 2012); научно-практической конференции, посвященной 85-летию кафедры инфекционных болезней и эпидемиологии Сибирского государственного медицинского университета (Томск, 2009).





Внедрение в практику

Полученные результаты включены в материалы лекций и практических занятий на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии с курсом клинической микробиологии ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» МЗ РФ. По результатам работы издано пособие для студентов «Микроэкология пищеварительного тракта. Дисбактериоз, методы лечения, профилактика» (Волгоград, 2011).

Результаты исследования внедрены и используются в работе Управления Роспотребнадзора по Волгоградской области, ГБУЗ «Волгоградская детская клиническая инфекционная больница», легли в основу рационализаторского предложения «Способ санации бактерионосителей Staphylococcus aureus» (удостоверение ВолгГМУ №18 от 29.06.2012).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 8 научных работ, в том числе 3 в журналах, рекомендуемых Перечнем ВАК Российской Федерации.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 5 глав собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, включающего 195 источник, в том числе 118 отечественных и 77 зарубежных авторов. Работа изложена на 137 страницах машинописного текста, иллюстрирована 28 рисунками и 17 таблицами.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии с курсом клинической микробиологии ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Для решения поставленных задач комплексному клинико-лабораторному обследованию был подвергнут 101 практически здоровый человек в возрасте от 18 до 25 лет, проживающих в районах города Волгограда с неравнозначной экологической нагрузкой. Критериями включения в группу служило отсутствие хронических и острых заболеваний на момент обследования, длительность проживания в городе не менее 10 лет, отрицание использования антибактериальных препаратов и пробиотиков в течение последних 3-х лет. Средний возраст составил 21,7±3,2 года. В дальнейшем эти наблюдаемые были разделены на группы в зависимости от экологии места проживания, при этом северная модельная территория была представлена Краснооктябрьским, центральная  - Центральным, южная  - Кировским и Красноармейским административными районами. Таким образом, было составлено 3 группы наблюдения: первая (I) - 33 человека, проживающих в южной части города, вторая (II) - 31 из северного и третья (III) - 37 из центрального условно-чистого модельного района (контрольная группа сравнения).

Изучение влияния факторов госпитальной среды на состав микрофлоры открытых биотопов и уровня носительства стафилококков осуществлено при обследовании 37 работников соматического стационара. При включении в группу использовали следующие критерии отбора: возраст от 21 до 25 лет (средний составил 23,3±2,8 года); длительность работы в стационаре не менее 3 лет; отсутствие острых и хронических заболеваний на момент обследования; отрицание использования антибактериальных препаратов в течение последнего года.

Всем наблюдаемым проводили микробиологический качественно-количественный анализ поверхностной микробной флоры кожи области локтевой ямки правой  руки, слизистых оболочек нижней трети носовых ходов, кишечника.

Забор материала и исследование качественного и количественного состава микрофлоры слизистых оболочек проводили по общепринятым методикам (приказ МЗ №535 «Об унификации микробиологических методов исследования, применяемых в клинико-бактериологических лабораториях лечебно-профилактических учреждений», 1985).

Для изучения микробиоценоза кожи использовали методику В.С. Крамарь (1997), при этом учитывали число первоначально выросших колоний с последующим пересчетом на 1 см2 исследуемой поверхности. При анализе учитывали 1) общую бактериальную плотность, 2) количество и видовой состав грампозитивных и грамнегативных бактерий; г) грибов рода Candida. Уровень микробной колонизации исследуемых биотопов оценивали в десятичных логарифмах от среднего количества микроорганизмов (lg КОЕ).

Количественный и видовой состав кишечной микрофлоры изучали по методике H. Haenel (1973) в модификации В.М. Коршунова с соавт., (1997). Оценку состояния биоценоза проводили в соответствии с рекомендациями, изложенными в «Отраслевом стандарте Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» (Приказ МЗ РФ №231 от 9.06.2003, ОСТ 91500.11.0004-2003).

Выделение и идентификацию стафилококков осуществляли в соответствии с приказами МЗ СССР N 535 (МЗ СССР от 22.04.85 г.) и №8 (МЗ РФ от 1995 г). Исследование выделенных культур по чувствительности к антибиотикам различных групп осуществляли с применением расширенного набора дисков согласно «Методическим указаниям по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» (МУК 4.2.1890-04 МЗ РФ, 2004). Метициллинустойчивые культуры (MRSA) выделяли на плотной селективной питательной среде, содержащей по методике Т.А. Афанасьевой (1998). Лизоцимную активность микроорганизмов изучали по методике, описанной В.М. Никитиным (1986). Лецитиназную активность штаммов определяли общепринятым методом на желточно-солевой среде Г.Н. Чистовича.



Pages:   || 2 | 3 | 4 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.