WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 


Pages:     | 1 | 2 || 4 |

Молекулярные маркёры сифилитической инфекции

-- [ Страница 3 ] --

Использование ГХ-МС позволяет с высокой степенью достоверности определить ранние признаки сифилитической инфекции и органных поражений в биологических жидкостях организма, наличие поражения органов и систем при отсутствии положительных серологических реакций и клинических проявлений болезни.

Они реализованы для исследования крови, мочи и ликвора.

В крови больных обнаружены липидные и углеводные соединения: высшие жирные кислоты и их изомеры (С13:0 и изомеры С13:0; С14:0 и С15:0; изомеры С16:0 и С16:0; С17:0 и С18:0; изомеры С19:0 и С20:0; С20:0 и С21:0). Также обнаружен холестерин и его эфиры, сквален. Среди углеводных компонентов присутствовали изомеры сахаров и ацетилированных сахаров — глюко-пираноза, манноза и манноза ацетат; сахароза, ацетил-сахароза и изомеры ацетил сахарозы, а также ацетилированные амины сахаров — N-ацетил-маннозамин и N-ацетил-глюкозамин.

Интересно обнаружение в крови сернистых соединений. Идентифицированы: L-метионин-сульфон — модифицированная аминокислота с сульфонильной группировкой; 1-1-сульфонил-бис (4-хлор) бензен с высокой токсичностью хлорированного остатка, ацетилированная 2-метил-S-пропановая кислота с тиогруппой и выраженным деструктивным действием, а также 4-4-дигидрокси-дифенилсульфон, N-N-бис-тетраметилен-тиурам-дисульфид и бензен-метан-сульфонилхлорид в минимальных концентрациях. Уровень их содержания был достаточно низок — 0,02±0,003 ммоль/л для минимальных значений и 0,09±0,008 ммоль/л для максимальных. Даже сравнительно невысокое содержание сернистых метаболитов в крови больных обладает достаточно выраженным повреждающим действием, поскольку эти соединения имеют сродство к коллагеновым структурам и способны повреждать ткани с развитием некроза и последующим распадом.

Важное значение имеет идентификация в крови соединений, относящихся к «активаторам кооперативной чувствительности микробов» — бутиролактон; 2, 3, 6, 7-тетрагидро-1-Н-5-Н-бензохинолон, 2,2-бихинолин; N-N-диметил-метамин-тригидро-боран и 2-фуранил-2-пропиеновая кислота. Известно, что генетический механизм реализации «кооперативной чувствительности» позволяет патогенным бактериям рационально использовать свой патогенный потенциал, определяя системой quorum sensing момент включения генов патогенности только после достижения бактериями определенной плотности популяции, при которой синтезирующееся количество факторов патогенности гарантирует успешное развитие инфекционного процесса. Рассматривая сифилитическую инфекцию как септикоподобное состояние, мы предложили использовать наличие активаторов «кооперативной чувствительности» в сыворотке крови для прогнозирования риска генерации инфекции.

При индикации молекулярных маркёров органных поражений использован опыт диагностики возможной локализации поражения при сепсисе с помощью ГХ-МС образцов крови больных [Истратов В. Г., Жуков А. О., 1999; Истратов В. Г. с соавт., 1995; Жуков А. О., 1998].

В моче кроме классических ЛЖК, фенолов и крезолов, идентифицирован ряд сернистых соединений и амидов, которые по нашему мнению, причастны к развитию почечных осложнений у больных сифилисом. С другой стороны, они связаны с вторичной инфекцией, проявляющейся в почечной патологии за счёт нарушения иммунной реактивности.

Исследования ликвора позволили оценить глубокие обменные и функциональные изменения, происходящие в тканях головного мозга при развитии сифилитической инфекции. Обнаружение в ликворе таких соединений, как предшественники и метаболиты окситриптомина позволяют делать выводы о существенных изменениях метаболической активности и функциональных способностях головного мозга. Особо следует обратить внимание на идентификацию естественных морфолиновых структур, обладающих сходными с опиатами частями структурной формы и действующими как транквилизаторы или естественные опиатоподобные структуры. Однако обнаружение такого соединения как тиоморфолин свидетельствует об опасности не только нарушения, но и разрушения определенных структур мозга, учитывая высокую токсичность идентифицированного соединения.

В качестве контроля изучены хроматографические показатели биологических жидкостей больных с инфекционной и паразитарной патологией (хирургический сепсис — 27 больных, туберкулёз — 21 больной и эхинококкоз печени — 15 больных). Молекулярные маркёры характерные для органных поражений при сифилисе при других видах патологии не выявлены.

Содержание активаторов кооперативной чувствительности в периферической крови больных сепсисом в основном совпадало с содержанием этих соединений в крови больных сифилисом, за исключением некоторого повышения содержания фурановых эфиров. Это соответствует нашему представлению о септикоподобном течении сифилиса с генерализацией инфекции на фоне резкого снижения системы антиинфекционной резистентности с участием разных как грамположительных, так и грамотрицательных видов микробов.

Спектр липидных соединений в периферической крови больных сепсисом отличался от спектра хроматографических изменений в периферической крови больных сифилисом. У больных сепсисом суммарное содержание ЛЖК составило 2,613±0,486 ммоль/л, а так называемых токсических метаболитов — 6,212±0,689 ммоль/л. В сыворотке больных сифилисом определялось высокое содержание жирных кислот и их изомеров с нечётным числом углеродных атомов, не определяющиеся в нормальной сыворотке крови.

Содержание маркёров органных поражений в периферической крови больных сепсисом отличалось от маркёров органных поражений у больных сифилисом. Это прежде всего касалось церебротоксических метаболитов — ди- и полиаминов и ароматических аминов, как показателей обширного распада тканей при сепсисе и появлении интоксикационной энцефалопатии в отличие от углеводных компонентов периферической крови больных сифилисом, предшественников и метаболитов триптофана в ликворе больных сифилисом.





Высокое содержание фенолов, крезолов и ароматических жирных кислот в периферической крови больных сепсисом при воспалительном поражении почек соответствовало высокому уровню содержания указанных соединений в моче больных сифилисом при поражении почек и мочеполового аппарата сифилитическим процессом. Определяемые у больных сифилисом в моче с помощью методов селективного ГХ-МС анализа молекулярные маркёры отсутствовали у больных сепсисом.

В группе больных туберкулёзом методами ГХ-МС-анализа в периферической крови обнаруживались микоцирозиновые кислоты и туберкулостеариновая кислота, которые не определялись у больных сифилисом.

В группе больных с эхинококкозом типичным являлось обнаружение метаболитов фарнезола-2-цис, 6-транс-фарнезола и 2-транс, 6-транс-фарнезола, а так же оболочечные метаболиты типа изомеров лейцина и изолейцина, что так же не обнаруживалось у больных сифилисом.

Прослежено распределение основных метаболитов по величине удельного веса (по данным факторного анализа). Первые шесть мест заняли метаболиты серотонина и триптофана и ацетилморфолин в ликворе, лактоны и сернистые соединения в моче и крови. В первой десятке — фенолы и амиды в моче, хинолоны и изомеры сахаров в ликворе.

Проведено распределение основных групп метаболитов на I, II и III уровни (молекулярные маркёры высокого, среднего и низкого уровня приоритетности). Критериями распределения были избраны величины удельного веса хроматографических тестов на основании факторного анализа, их сопоставимость с клиническими результатами и, наконец, сведения по диагностической эффективности распределения данных.

К молекулярным маркёрам высокого уровня приоритетности (метаболиты первого уровня) отнесены следующие метаболиты: активаторы кооперативной чувствительности — лактоны; ацетилморфолин в ликворе; метаболиты триптофана в ликворе; метаболиты серотонина в ликворе; сернистые соединения в крови; активаторы кооперативной чувствительности; фенолы в моче; амиды в моче.

Диагностическая эффективность молекулярных маркёров высокого уровня приоритетности составляла по диагностической чувствительности — от 55,9% до 96,7%; по положительной диагностической предсказуемости — от 62,5% до 94,1%. Сопоставимость клинических и хроматографических данных составила от 72,7% до 96,9%, уровень удельного веса — от 0,744 до 0,903 (с 1 по 11 место).

К молекулярным маркёрам среднего уровня приоритетности (метаболиты второго уровня) отнесены следующие метаболиты: активаторы кооперативной чувствительности — хинолоны; липидные компоненты сыворотки крови; сернистые соединения в моче.

Диагностическая эффективность молекулярных маркёров среднего уровня приоритетности составляла: по диагностической чувствительности от 75,0% до 94,5%; по положительной диагностической предсказуемости от 75,0% до 80,9%.

Таблица 4

Параметры диагностической значимости молекулярных маркёров сифилиса (в %)

ГХ-МС показатели Диагностическая эффективность (%)
ДЧ ДС ДПпол. ДПотр.
Индикация активаторов «кооперативной чувствительности» микробов Лактоны (бутиролактон) 95,9 44,4 88,9 44,4
Хинолоны (2,3,6,7-тетрагидро-1-н-5-н-бензохинолон) 94,5 61,6 80,9 25,0
Фурановые эфиры бора (N-N-диметил-метамин-дигидроборан и 2-фуранил-2пропиеновая кислота) 96,7 50,0 88,1 60,0
Биохимические изменения сыворотки крови Сернистые соединения 88,2 80,0 94,1 60,0
Липидные компоненты 93,3 50,0 80,0 83,3
Углеводные компоненты 69,2 75,0 61,5 33,3
Индикация молекулярных маркёров органных поражений Нервная система (головной мозг) Метаболиты серотонина (индолуксусная и индолмасляная кислоты) 75,0 25,0 62,5 50,0
Метаболиты триптофана (ацетилированные формы триптофана) 88,8 60,0 77,7 80,0
Ацетилморфолин 80,0 75,0 90,0 50,0
Изомеры сахаров в ликворе 85,7 20,0 43,2 80,0
Почки Сернистые соединения в моче 75,0 50,0 75,0 50,0
Фенолы и амиды в моче 88,8 80,0 88,8 80,0
Фенилкарбоновые кислоты в моче 71,4 25,0 57,1 50,0
ЛЖК в моче 66,6 45,3 33,6 41,2


Pages:     | 1 | 2 || 4 |
 




Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.