WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:     | 1 | 2 ||

Особенности метаболизма и кинетики сократительных белков скелетных мышц голени в условиях репаративной регенерации костной ткани

-- [ Страница 3 ] --

В конце срока фиксации аппаратом, для оперированной конечности ЛДГ активность составляла 54,7%, КК активность 93% от значений характерных для интактных животных.

Таблица 4. Креатинкиназная активность миозина скелетных мышц собак после моделирования оскольчатого перелома костей голени (медиана)
Срок эксперимента ПББМ ИКМ
К О К О
Здоровые животные 5,228 1,399
21-е сутки фиксации 1,867* 2,737* 2,454 1,694*
28-е сутки фиксации 1,483* 1,109 0,559* 0,251
49-е сутки фиксации 1,159 1,633* 1,310* 4,059*
15-е сутки без аппарата 1,270* 1,504 6,733 3,349*
1 месяц без аппарата 1,884* 1,748 1,589* 1,697
3 месяца без аппарата 1,251* 1,244* 3,608* 6,054
Примечание: К - контралатеральная конечность, О – оперированная конечность. *- достоверные различия с интактными мышцами при р<0,05.

После снятия аппарата Илизарова наблюдалось снижение ферментативной активности миозина. Аналогично изменениям в АТФ-азной активности миозина снижение КК и ЛДГ активности имело низкую динамику по сравнению с первой группой животных. Через 3 месяца после снятия аппарата КК активность была на 60,3%, а ЛДГ на 76% ниже значений характерных для интактных животных. На отдаленных сроках, 1–3 месяца после снятия аппарата, при удлинении конечности мы наблюдали восстановление как кинетических показателей АТФ-азной активности препарата миозина, так и его ЛДГ и КК активности. В то же время при травме восстановление наблюдалось на сроках превышающих 3 месяца.

Анализ полученных кинетических характеристик миозина как АТФ-азы провести достаточно трудно по ряду причин. Прежде всего, характер зависимости скорости гидролиза АТФ миозином от концентрации субстрата имел сигмоидальную зависимость (рисунок 6). Это свидетельствует о том, что реакция взаимодействия миозина с АТФ носила полисубстратный характер, с большим числом аллостерических центров. При росте сродства миозина к субстрату и параллельном увеличении скорости данной ферментативной реакции происходит снижение числа активных центров с одновременным увеличением активности оставшихся Причина наблюдаемого увеличения сродства миозина к АТФ, на наш взгляд, состоит в том, что в посттравматический период в мышцах как травмированного, так и контралатерального сегмента конечности синтезировался миозин с измененными кинетическими характеристиками и происходила модификация уже функционирующих молекул данного сократительного белка. Последнее предположение объясняет наблюдаемый нами высокий уровень Vmax и сродства миозина к АТФ через три месяца после окончания лечения, при полном цикле обмена миозина в скелетных мышцах до 100 дней (Иванов И.И., Коровкин Б.Ф., Пинаев Г.П. Биохимия мышц, 1977).

 Зависимости скорости гидролиза АТФ миозином от концентрации-10
Рисунок 6. Зависимости скорости гидролиза АТФ миозином от концентрации субстрата


Полученные нами данные позволяют утверждать, что снижение сократительной способности скелетных мышц после травм происходило на фоне роста сродства миозина к АТФ в мышцах в посттравматический период. Данные, полученные при исследовании перекисного окисления белка на длинах волн 270 нм, 363 и 370 нм подтверждают, что при повреждении мышечного волокна как вследствие удлинения конечности по методу Илизарова, так и при травме, происходит модификация миозина и, как следствие, повышение сродства и скорости реакции гидролиза АТФ.

Наблюдаемая нами картина при длинах волн 363 нм и 370 нм для ИКМ была аналогична таковой при 270 нм. В середине срока дистракции нами отмечено возрастание содержания продуктов перекисного окисления белка до 250 ед/г белка. Тенденция к возрастанию оптической плотности продолжалась также в середине фиксации (рисунок 7, 8) К концу срока фиксации нами отмечено снижение оптической плотности до физиологической нормы. После снятия аппарата на сроке 3 месяца без аппарата наблюдался подъем оптической плотности до 300 ед/г белка. В данный период происходило окончательное замещение модифицированного белка на белок, по характеристикам схожий с белком взрослых, здоровых, неоперированных животных. В целом картина образования продуктов перекисного окисления белка согласуется с данными, полученными при изучении кинетических особенностей реакции гидролиза АТФ препаратом миозина скелетных мышц собак и его КК и ЛДГ активности.

 Содержание продуктов перекисного окисления белка-11  Содержание продуктов перекисного окисления белка регистрируемых-12
Рисунок 7. Содержание продуктов перекисного окисления белка регистрируемых при длине волны 270нм в скелетных мышцах собак при оперативном удлинении костей голени

Наблюдаемые изменения в системе перекисного окисления в скелетных мышцах при удлинении конечности можно отнести к реакциям

 Содержание продуктов перекисного окисления белка-13  Содержание продуктов перекисного окисления белка регистрируемых-14
Рисунок 8. Содержание продуктов перекисного окисления белка регистрируемых при длинах волн 363 и 370нм в скелетных мышцах собак при оперативном удлинении костей голени

неспецифического ответа ткани на внешнее воздействие, т.к. подобные изменения данных показателей обнаруживались и в сыворотке крови (рисунок 9).Такие изменения на системном и тканевом уровне мы сочли возможным рассматривать как неспецифические на том основании, что подобные изменения наблюдались и при воздействиях иного рода (М.В. Стогов, Л.С. Кузнецова, С.А. Ерофеев, 2001).

 Содержание продуктов ПОБ в сыворотке крови экспериментальных-15
Рисунок 9. Содержание продуктов ПОБ в сыворотке крови экспериментальных животных. Примечание: по оси ОХ – сроки эксперимента: 1 – до операции, 2 – 7-е сутки дистракции, 3 – 14-е сутки дистракции; 4 – 21-е сутки дистракции, 5 – 28-е сутки дистракции; 6 – 15-е сутки фиксации; 7 – конец фиксации (30-е сутки); 8 – 1 месяц после снятия аппарата

Сравнивая результаты исследования мышц оперированных и неоперированных конечностей, можно заключить, что процесс ПОБ затрагивает не только поврежденные участки мышечной ткани, но и весь организм в целом.

В начале фиксации аппаратом Илизарова в оперированной передней большеберцовой мышце нами отмечена активация процессов перекисного окисления белка, что было выражено в достоверном резком подъеме оптической плотности до 250 ед*1000/г белка (рисунок 10). К середине фиксации наблюдался статистически значимый рост концентрации продуктов перекисного окисления белка, выраженный в подъеме оптической плотности до 270 ед/г белка. Тенденция к накоплению продуктов перекисного окисления белка сохранялась до конца фиксации. Через месяц после снятия аппарата Илизарова происходило снижение концентрации продуктов перекисного окисления белка 190 ед*1000/г белка. На отдаленных сроках после снятия аппарата вновь наблюдалось достоверное увеличение оптической плотности во всех типах исследуемых мышц больше 300 ед*1000/г белка.

 Содержание продуктов перекисного окисления белка-16  Содержание продуктов перекисного окисления белка-17
Рисунок 10. Содержание продуктов перекисного окисления белка регистрируемых при длине волны 270нм в скелетных мышцах собак после моделирования оскольчатого перелома костей голени




Для оперированной икроножной мышцы динамика изменения содержания продуктов перекисного окисления белка была несколько иной, нежели для передней большеберцовой мышцы.

 Содержание продуктов перекисного окисления белков в сыворотке-18
Рисунок 11. Содержание продуктов перекисного окисления белков в сыворотке крови в условиях лечения оскольчатого перелома костей голени. Примечание: по оси ОХ – сутки эксперимента, д/о – дооперационные значения; 30БА – 30-е сутки после снятия аппарата.

Она характеризовалась постепенным увеличением количества продуктов перекисного окисления белка в мышце до окончания фиксации аппаратом Илизарова и постепенным их снижением вплоть до отдаленных сроков. Как видно на рисунке 11, концентрация продуктов ПОБ в крови экспериментальных животных находилась выше нормы все время проведения эксперимента. Наблюдаемые нами увеличения концентрации соответствовали пикам в мышечной ткани. Уменьшение концентрации продуктов ПОБ имело более низкую динамику, чем при удлинении аппаратом Илизарова. Через 30 дней после снятия аппарата разница концентраций продуктов ПОБ с дооперационными значениями составляла 0,5%.

ВЫВОДЫ

  1. После удлинения конечности аппаратом Илизарова в срок до 1 месяца после снятия аппарата наблюдается рост АТФ-азной активности миозина скелетных мышц, а также снижение его лактатдегидрогеназной активности до 23% от нормы и креатинкиназной активности до 21,6% от нормы. В крови наблюдался рост активности креатинкиназы до 1060 Е/л и лактатдегидрогеназы до 2700 Е/л.
  2. После лечения травмы конечности аппаратом Илизарова в срок до 1 месяца после снятия аппарата в мышцах происходит рост АТФ-азной активности миозина, а также наблюдается снижение лактатдегидрогеназной активности миозина до 54% от нормы и креатинкиназной активности до 30,7% от нормы. В крови отмечается подъем лактатдегидрогеназной активности до 3900 Е/л и креатинкиназной до 3000 Е/л.
  3. В посттравматический период в мышцах как травмированного, так и контралатерального сегмента конечности, на основании данных, полученных при исследовании перекисного окисления белка в мышцах и крови, происходит модификация зрелых молекул миозина. Снижение сократительной способности скелетных мышц после повреждения конечности не связано со снижением сродства миозина к АТФ.
  4. АТФ-азная, креатинкиназная и лактатдегидрогеназная активность миозина передней большеберцовой мышцы, как в норме, так и при травме выше на 5-7%, чем икроножной мышцы.
  5. После удлинения конечности аппаратом Илизарова происходит восстановление кинетических свойств миозина до значений характерных для интактных животных не ранее чем через 2 месяца. После травмы конечности и последующего лечения аппаратом Илизарова динамика восстановления кинетических свойств миозина снижена, и их восстановление до значений, характерных для интактных животных, происходит не ранее чем через 3 месяцев.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

  1. Гайдышев А.И. Изучение АТФ-азной активности препарата скелетных мышц собак / А.И. Гайдышев, М.В. Стогов // Актуальные вопросы ветеринарной хирургии : материалы науч.-практ. конф. - Курган, 2006. - C. 12-14.
  2. Стогов М.В. АТФ-азная активность препарата миозина скелетных мышц после удлинения конечности / М.В. Стогов, А.И. Гайдышев // Гений ортопедии. - 2007. - № 3. - С.53-56.
  3. Стогов М.В. Активность ферментов в тканях у собак при удлинении конечности методом Илизарова с темпом дистракции 3 мм в сутки в автоматическом режиме / М.В. Стогов, С.Н. Лунева, А.И. Гайдышев, и др. // Клеточные и нанотехнологии в биологии и медицине: Мат. Всерос. науч.-практ. конф. - Курган, 2007. - C. 122-123.
  4. Шевцов В.И. О перспективах использования наноматериалов в лечении повреждений и заболеваний тканей опорно-двигательной системы / В.И. Шевцов, С.Н. Лунева, А.И. Гайдышев, и др. // Гений ортопедии. - 2008. - № 4. - С. 26-31.
  5. Стогов М.В. Biochemical investigations of skeletal muscles in limb lengthening according to the Ilizarov method / М.В. Стогов, А.А. Еманов, А.И. Гайдышев // 5th Meeting of the A.S.A.M.I. International. -Kurgan, 2008. - P. 333-334.
  6. Лунева С.Н. Влияние низкомолекулярных неколагеновых белков с инсулинподобными свойствами на активность препарата миозина / С.Н. Лунева, М.В. Стогов, А.И. Гайдышев, и др. // Медицинская наука и образование Урала. - 2009. - № 3. - С. 14-15.
  7. Гайдышев А.И. Изменение максимальной скорости реакции препарата миозина скелетных мышц собак при моделировании оскольчатого перелома костей голени с последующим лечением аппаратом Илизарова / А.И. Гайдышев, С.Н. Лунева, М.В. Стогов, // Мат. Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Илизаровские чтения». -Курган, 2011. -С. 469.
  8. Стогов М.В. Активность миозина в скелетных мышцах собак при удлинении костей голени / М.В. Стогов, А.И. Гайдышев // Сб. материалов междун. науч.-практической конф. «Психолого-педагогические и медико-биологические проблемы физической культуры, спорта, туризма и олимпизма: инновации и перспективы развития». -Ч. 2. Челябинск, 2011.- С. 209-212.
  9. Стогов М.В. Кинетические характеристики миозиновой АТ

    Pages:     | 1 | 2 ||
     


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.