WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 |

Биохимические аспекты нарушений сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза и методы их коррекции при метаболическом синдроме

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Хабарова Ольга Витальевна

Биохимические аспекты нарушений сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза и методы их коррекции при метаболическом синдроме

03.01.04 – биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени

кандидата биологических наук

Ростов-на-Дону

2012

Работа выполнена на кафедре биохимии и микробиологии факультета биологических наук Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Южный федеральный университет» (г. Ростов-на-Дону)

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Внуков Валерий Валентинович
Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Погорелова Татьяна Николаевна (г. Ростов-на-Дону) доктор медицинских наук, профессор Франциянц Елена Михайловна (г. Ростов-на-Дону)
Ведущая организация: ГОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия» (г. Нижний Новгород).

Защита диссертации состоится 28 мая 2012 г. в 13.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.208.07 в ФГАОУ ВПО «Южный федеральный университет» (г. Ростов-на-Дону, пр. Стачки 194/1, акт. зал).

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке ФГАОУ ВПО «Южный федеральный университет» по адресу: г. Ростов-на-Дону, ул. Пушкинская, 148).

Автореферат разослан «___»__________ 2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

кандидат биологических наук, с.н.с. Асланян Е.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Распространенность ожирения и метаболического синдрома (МС) приобретает глобальный характер среди населения практически всех развитых стран мира. В России «эпидемия МС» достигает уровня 25-35% и более среди взрослого населения (Балукова Е.В. и др., 2008). Высокий риск раннего развития ишемической болезни сердца (ИБС), сахарного диабета 2-го типа и атеросклероза у больных с МС придает этому синдрому особое медико-социальное значение. Доказано, что риск развития ИБС и/или инсульта у пациентов с МС повышен в 3-3,5 раза. Как показывает статистика, наибольший процент инвалидизации и летальности в этой группе связан с сосудистыми осложнениями, нарушениями процессов свертывания крови с развитием внутрисосудистого тромбообразования. Показано, что смертность пациентов с МС от сердечно-сосудистых заболеваний в 23 раза выше, чем в общей популяции (Бутрова С.А., 2001). Развивающиеся на фоне МС нарушения тромбоцитарного и плазменного гемостаза способны приводить к тромбозам различной локализации с тяжелыми последствиями (Ройтберг Г.Е. и др., 2007), при этом наличие гиперинсулинемии может усиливать тромбогенные осложнения (Lusher J.F., 1994).

Данные литературы, посвященные вопросам состояния системы гемостаза при МС, ограничиваются либо констатацией наличия «гиперкоагуляционной направленности», либо содержат сведения об изменении уровня отдельных показателей. В опубликованных материалах имеются сведения о повышении содержания фибриногена, снижении фибринолиза, активации тромбоцитов при данной патологии. Несмотря на пристальное внимание к этой проблеме со стороны медико-биологических наук, многие вопросы патогенеза метаболического синдрома, в том числе и механизм развития гемостазиологических нарушений, связь этих изменений с эндотелиальной дисфункцией, остаются неразрешёнными. В этой связи изучение показателей сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза, степени выраженности их изменений в зависимости от повреждения эндотелия, наличия воспалительного процесса при МС, а также поиск эффективной корригирующей терапии, направленной на максимальное снижение тромбогенного потенциала крови, а, следовательно, и риска развития сердечно-сосудистых заболеваний, представляется весьма актуальным.

Целью работы явилось изучение биохимических показателей сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза и обоснование методов коррекции выявленных нарушений при МС.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Исследовать показатели функциональной активности сосудистого эндотелия.

2. Изучить состояние тромбоцитарного звена гемостаза.

3. Исследовать состояние плазменного звена гемостаза.

4. Оценить состояние системы глутатиона.

5. Определить уровень маркеров воспалительного процесса.

6. Провести сравнительную оценку эффективности методов дието- и фармакотерапии МС с позиции их влияния на показатели сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза, систему глутатиона, выраженность воспалительной реакции.

Научная новизна работы. В работе получены новые данные, свидетельствующие о наличии взаимосвязи изменений в системе гемостаза с активностью глутатионовой системы, развитием воспалительного процесса, нарушениями липидного, углеводного обменов, содержания мочевой кислоты при МС.



Впервые установлено, что комплексное использование сбалансированной по содержанию углеводов и жиров диеты в сочетании с физическими упражнениями приводит к стабилизации показателей функции сосудистого эндотелия, восстановлению системы глутатиона, снижению выраженности воспалительных процессов.

Впервые показано, что применение лекарственных средств, повышающих чувствительность тканей к инсулину (метформин) и содержащих -3- полиненасыщенные жирные кислоты (-3-ПНЖК) (омакор), в разной степени приводит к снижению тромбогенного потенциала крови, восстановлению глютатионовой системы у пациентов с МС.

Положения, выносимы на защиту

1. Развитие метаболического синдрома сопровождается ростом тромбогенного потенциала крови в результате нарушений сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза, снижением активности ферментов глутатионовой системы и содержания восстановленного глутатиона.

2. Комплексное применение сбалансированной по содержанию жиров и углеводов диеты, индивидуально подобранной физической нагрузки, лекарственных средств – метформина, снижающего чувствительность тканей к инсулину и омакора, обладающего гиполипидемическим эффектом, способствует снижению у больных с МС активации сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза, восстановлению системы глутатиона, снижению содержания маркеров воспалительного процесса.

Научно-теоретическое и практическое значение результатов исследования. Выполненная работа позволяет расширить существующие представления о патогенезе метаболического синдрома, сформировать целостное представление о роли нарушений сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза в развитии заболевания.

Проведена сравнительная оценка и дано теоретическое обоснование применения методов дието- и фармакотерапии при метаболическом синдроме для коррекции биохимических нарушений сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза.

Показано, что важнейшими компонентами в развитии метаболического синдрома являются активация тромбогенного потенциала крови, снижение активности глютатионовой системы, развитие реакции воспаления. Нормализация функции эндотелия, показателей плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза, глютатионовой системы, снижение содержания маркеров воспалительной реакции могут быть достигнуты при комплексном применении сбалансированной диеты в сочетании с физическими упражнениями и использовании лекарственных средств, снижающих инсулинрезистентность (ИР) (глюкофаж) и гиполипидемических, содержащих -3-ПНЖК (омакор).

Предложен перечень информативных биохимических показателей развития патологического процесса, характеризующийся простотой и оперативностью выполнения, который может быть использован для оценки степени тромбогенного риска у пациентов с МС.

Полученные в процессе проведенного исследования результаты могут использоваться в клинике как для диагностики состояния пациентов с метаболическим синдромом, так и для оценки эффективности проводимой терапии.

Апробация диссертационной работы. Материалы диссертации были представлены на ежегодной конференции «ДиаМА» (г. Ставрополь, 2009); Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы диагностики и лечения венозных и артериальных тромбозов» (г. Санкт-Петербург, 2010); Всероссийской научно-практической конференции «Модернизация науки и образования» (г. Махачкала, 2011); Областной научно-практической конференции «День специалиста клинической лабораторной диагностики» (г. Ростов-на-Дону, 2012).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 работ, из них 2 в журналах, рекомендованных ВАК РФ. Общий объем публикаций 0,83 п.л., личный вклад 63%.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 197 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов и их обсуждения, выводов, списка литературы, включающего 112 отечественных и 97 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 28 таблицами и 24 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследуемая группа больных была сформирована из 57 пациентов обоего пола (33 женщины и 24 мужчин) в возрасте от 30 до 58 лет, которым впервые был установлен диагноз МС врачом-эндокринологом Ростовского эндокринологического центра городской больницы № 4. Лабораторное обследование больных отобранной группы проводилось на базе клинико-диагностического лабораторного комплекса ГБУ РО «ОКДЦ». В качестве контроля использовали данные обследования 20 здоровых доноров соответствующего пола (11 женщин и 9 мужчин) и возраста, худощавого телосложения, без вредных привычек. Обследуемая группа больных согласно критериям диагностики МС (Всемирной организации здравоохранения, 1998 и Международной диабетической организации, 2005) имела: индекс массы тела (ИМТ) 37,42±2,8 кг/м2; отношение объёма талии к объёму бёдер (ОТ/ОБ) 0,94±0,03; уровень глюкозы натощак 6,12±0,05 ммоль/л; уровень иммунореактивного инсулина (ИРИ) 19,64±1,0 мкМЕ/л; индекс Caro 0,31±0,02; коэффициент атерогенности (Ка) 3,15±0,16; артериальное давление (АД) 145±10/ 95±5. Пациенты с МС были разделены на 3 группы в зависимости от выраженности метаболических нарушений и назначенной врачом-эндокринологом терапии:





- первую группу составили 20 пациентов (11 женщин и 9 мужчин), которым в качестве немедикаментозной терапии была назначена гипокалорийная диета с пониженным содержанием жиров и рациональная физическая нагрузка в виде ежедневной 30-минутной аэробной гимнастики.

- вторую группу составили 18 пациентов (10 женщин и 8 мужчин) с наиболее выраженными изменениями со стороны углеводного обмена, которым было назначено лечение препаратом глюкофаж (метформин ) в дозе 1000 мг/в сут;

- третью группу составили 19 пациентов (12 женщин и 7 мужчин), имеющих наиболее выраженные изменения со стороны липидного обмена, которым было назначено лечение препаратом омакор в дозе 1000 мг/в сут. Исследования осуществлялись исходно, через 3 и 6 месяцев после начала терапии.

Получение биологического материала. Кровь собирали утром натощак путем пункции локтевой вены, используя вакуумные системы для забора крови без антикоагулянтов для получения сыворотки и с антикоагулянтами (гепарин, цитрат натрия) для получения плазмы. Забор крови проводили в 3 этапа: до лечения (исходно), через 3 и 6 месяцев после начала терапии.

Методы определения показателей системы гемостаза. Содержание эндотелина-1 (Эн-1) в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА) наборами Biomedica Gruppe (Австрия), оксид азота (NO) - колориметрическим методом наборами RD Systems (США) на автоматическом анализаторе Labsystems Eims (Финляндия); концентрацию гомоцистеина - энзиматическим методом наборами фирмы DyaSis (Германия) на автоматическом анализаторе Сапфир 400 (Япония). Регистрацию скорости и степени агрегации проводили на оптическом агрегометре Chrono Log 490D (США); протромбиновое время (ПВ), активированное частично тромбопластиновое время (АЧТВ), тромбиновое время (ТВ), активность плазминогена (Пл), антитромбина III (АнтIII), активность системы протеина С, факторов свертывания крови (FVIII, FIX, FXIII), фактора Виллебранда (FW), ингибитора активатора плазминогена (PAI-1), содержание Д-димера определяли в цитратной бедной тромбоцитами плазме стандартными клиническими наборами фирмы «Dade Behring» (Германия) на автоматическом коагулометре BCT Dade Behring; фибринолитическую активность плазмы (фибринолиз) определяли с помощью наборов фирмы «Технология Стандарт» методом Kowarzyk, Buluk (1954); содержание растворимых фибрин-мономерных комплексов (РФМК) - ортофенантролиновым методом с помощью наборов «Технология Стандарт».

Методы определения показателей глутатионовой системы. Активность глутатионпероксидазы (GPox) определяли по методу Моин (1986); активность глутатионредуктазы (GRe) - по методу Юсупова (1989); содержание восстановленного глутатиона (GSH) - по методу Ellman (1959).

Методы определения маркеров воспаления. Содержание С-реактивного белка (shСРБ) определяли высокочувствительным нефелометрическим методом наборами фирмы Siemens на лазерном автоматическом нефелометре Siemens BN Pro Spec; содержание фибриногена - наборами фирмы «Dade Behring» на автоматическом коагулометре BCT Dade Behring.

Методы определения показателей углеводно-инсулинового, липидного, пуринового обменов, содержания магния. Определение содержания глюкозы проводили натощак в венозной крови глюкозооксидазным методом стандартными наборами фирмы «Ольвекс» (С.-Петербург); содержание иммунореактивного инсулина (ИРИ) - наборами «IRI» на автоматической иммунофлюоресцентном анализаторе закрытого типа Tosoh AIA -1800 (Япония); показатели липидного обмена: содержание общего холестерина (ОХС), триглицеридов (ТГЛ), холестерина липопротеинов очень низкой плотности (ХС-ЛПВ) определяли ферментативными колориметрическими методами наборами «Dade Behring» на автоматическом анализаторе Dimension (Германия); содержание аполипопротеинов А-1 и В (АПО-А-1, АПО-В) - наборами фирмы Siemens на лазерном автоматическом нефелометре Siemens BN Pro Spec ; свободных жирных кислот (СЖК) - ферментативным методом наборами фирмы Diasys (Германия) на полуавтоматическом анализаторе BS 3000; содержание мочевой кислоты и концентрацию ионов магния (Mg) определяли колориметрическим методом наборами фирмы Randox (Англия) на автоматическом анализаторе Сапфир 400 (Япония).

Статистическую обработку результатов проводили с помощью программ Exel 8,0 и Statistica 5. Значимость различий между изучаемыми величинами определяли по t-критерию Стьюдента. Различия считали достоверными при p<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Показатели сосудисто-тромбоцитарного и плазменного гемостаза при метаболическом синдроме

Прежде всего, был проведен анализ метаболических нарушений, развивающихся при МС. Для этого показатели всех больных с МС, полученные до лечения, сравнивали с аналогичными показателями контрольной группы, которую составляли здоровые (в эндокринологическом плане) доноры.

Функциональное состояние сосудистого эндотелия у больных с МС

В результате проведенного нами исследования было установлено, что у больных с МС содержание Эн-1, FW, PAI-1 превышало аналогичные показатели здоровых доноров на 218, 47 и 30%, соответственно, т.е. в значительной степени был повышен уровень вазоконстрикторов. В то же время наблюдалось снижение основного вазодилататора - NO - на 32% (Рис. 1). Анализ содержания маркеров повреждения эндотелия позволяет заключить, что у обследованных нами пациентов с МС имеет место эндотелиальная дисфункция. Повышение уровня FW и PAI-1 свидетельствует о росте прокоагулянтного потенциала. Наличие гипергомоцистеинемии, выявленное у больных с МС, является дополнительным фактором риска развития атеротромбоза.

Состояние тромбоцитарного гемостаза у больных с МС



Pages:   || 2 | 3 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.