WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 |

Показатели противодифтерийного антитоксического иммунитета у детей и совершенствование тактики контроля дифтерии.

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

АЛЕКСЕЕВА

Елена Андреевна

ПОКАЗАТЕЛИ ПРОТИВОДИФТЕРИЙНОГО АНТИТОКСИЧЕСКОГО ИММУНИТЕТА У ДЕТЕЙ И СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТАКТИКИ КОНТРОЛЯ ДИФТЕРИИ.

03.02.03 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

г. Санкт-Петербург

2012

Работа выполнена в ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Вологодской области» и ФБУН «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера» Роспотребнадзора

Научный руководитель:

Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук,

профессор Галина Яковлевна Ценева

Официальные оппоненты:

Сиволодский Евгений Петрович - доктор медицинских наук, профессор, ФГКВОУ ВПО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова», кафедра микробиологии, профессор

Кветная Ася Степановна - доктор медицинских наук, профессор, ФГБУ «Научно-исследовательский институт детских инфекций Федерального медико-биологического агентства», бактериологическая лаборатория, заведующая

Ведущее учреждение:

ГБОУВПО «Северо-Западный Государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова» Министерства здравоохранения РФ

Защита диссертации состоится 22 января 2013 года в 15-00 часов на заседании диссертационного совета Д 215.002.08 на базе ФГКВОУ ВПО «Военно-медицинская академия имени С.М.Кирова» МО РФ (194044, Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, д. 6)

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке ФГКВОУ ВПО «Военно-медицинская академия имени С.М.Кирова» МО РФ

Автореферат разослан «___» декабря 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук профессор

Юрий Алексеевич Митин

ОБЩАЯ ХАРАКТРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время дифтерийная инфекция продолжает оставаться серьезной проблемой для здравоохранения. Несмотря на стабилизацию показателей заболеваемости дифтерией в РФ отмечаются случаи заболевания и бактерионосительства среди детского населения в отдельных регионах.

Важно отметить, что продолжают регистрироваться случаи заболеваний дифтерией среди привитых. Так, в г. Вологде и в Вологодской области в последние годы у 80 % заболевших дифтерией в крови определялись антитоксические антитела в титрах 1:40-1:80 и выше (по данным РПГА), которые согласно нормативным документам рассматриваются как обеспечивающие невосприимчивость к инфекции. Однако в последние годы показано, что метод РПГА не отражает истинного состояния невосприимчивости к дифтерии, т.к. коэффициент корреляции между результатами исследования сывороток в РПГА и классической реакции нейтрализации в культуре клеток Vero, принятой в качестве «золотого» стандарта, равен r = 0,5. В то же время этот же показатель для ИФА и РН (Vero) составил 0,95 с уровнем достоверности p < 0,05. (Краева Л.А., 2011 г.).

Известно, что в создании устойчивого иммунитета к инфекционным заболеваниям важное значение имеет не только количество антител, вырабатываемых в результате вакцинации, но особенно их качество. Этот показатель характеризует прочность и устойчивость образованного комплекса «антиген – антитело» (авидность). Установлено, что низкоавидные антитела не могут защитить человека от заболевания в случае инфицирования (Usinger W.R., 1999). Для ряда инфекций (ЦМВ, ВИЧ, краснуха, эпидемический паротит, токсоплазмоз, шистоматоз) зарубежными производителями выпускаются коммерческие тест-системы, в которых предусмотрено определение авидности, рассчитаны критерии невосприимчивости к инфекциям управляемым вакцинопрфилактикой (Eggers M, 2000; Prince H.E., 2002; Le Guillou H. 2001; Bottiger B., 1997). В последние годы появились результаты изучения авидности противодифтерийных антитоксических антител у взрослых лиц, получивших ревакцинирующие прививки с интервалом не менее 10 лет (Краева Л.А., 2011).

Изучение авидности антител у детского населения, получившего цикл вакцинирующих и ревакцинирующих прививок против дифтерии, равно как использование метода ИФА для контроля иммунитета, не проводилось.

Учитывая, что в постэпидемический период, особенно в период 2-ой волны подъема заболеваемости дифтерией, болели преимущественно дети, представлялось важным провести комплексное изучение состояния их противодифтерийного иммунитета с применением новых методических подходов.

Известно, что серьезную проблему представляют бактерионосители C.diphthriae, создающие опасность инфицирования возбудителем дифтерии детей особенно в организованных коллективах. Современный лабораторный диагноз базируется на традиционных приемах обнаружения возбудителя, его токсигенности и выявлении специфических антител методом РПГА. Однако они не решают проблемы экспрессной диагностики и выявления штаммов с «молчащим» геном токсигенности. Для повышения эффективности бактериологической диагностики дифтерии необходимо было оценить значение метода ПЦР для выявления C.diphthriae у детей с клиническим статусом и «так называемых» здоровых.

Изложенное определило необходимость комплексных исследований, направленных на выяснение роли высокоавидных антител в защите от инфекции у детей, их использования для контроля поствакцинального иммунитета и выявление особенностей биологических свойств C.diphthriae, циркулирующих в период вакцинопрофилактики.



Цель исследования:

Оценить показатели поствакцинального иммунитета и степень защищенности детей от дифтерии, совершенствовать тактику контроля дифтерийной инфекции.

Задачи работы:

  1. Определить защищенность от дифтерии детского населения с использованием современных методов серологической диагностики.
  2. Оценить роль высокоавидных антитоксических противодифтерийных антител в формировании устойчивого поствакцинального иммунитета у детей. Изучить особенности динамики их накопления и регрессии у детей.
  3. Определить особенности основных биологических свойств C.diphtheriae, циркулирующих в периоды подъема и спада уровней заболеваемости дифтерией.
  4. Разработать алгоритм лабораторного контроля противодифтерийного иммунитета у детей.

Научная новизна. Впервые определен уровень суммарных и высокоавидных АТ-АТ у детей, получивших комплекс вакцинирующих и ревакцинирующих прививок.

Для оценки индивидуального и коллективного иммунитета против дифтерии у детей применен метод ИФА и его модификация, определены достоверные критерии невосприимчивости.

Впервые установлена возрастная группа «риска» (9-13 лет), содержащая в крови низкие уровни АТ-АТ независимо от соблюдения графика прививок.

Выявлена особенность динамики накопления и снижения уровня высокоавидных АТ-АТ у детского населения, состоящее в более длительном сохранением высокоавидных антител, чем у взрослого населения.

Возможная причина супрессии tox-гена у штаммов C. diphtheriae, изолированных от больных с ЛОР-патологией в период подъема заболеваемости может быть связана с использованием пациентами антибактериальных препаратов для лечения основного заболевания.

Установлена высокая частота резистентности штаммов C. diphtheriae, выделенных в 2009-2010 гг., к тетрациклину (83%) и пенициллину (59%) по сравнению с таковыми у штаммов, выделенных в 2005-2006 гг.

Практическое значение. Апробирован и внедрен в практику простой и наиболее адекватный тест для измерения авидности противодифтерийных антитоксических антител с использованием ИФА с расчетом индекса авидности (ИА), позволяющий определять истинные протективные антитела. При коэффициенте ИА, равном 10, обследуемые являются незащищенными, при ИА, равном 30 и более, обеспечивается защита от заболевания на 95% в течении не менее 7 лет.

Данные по проведению и использованию ИФА в практических лабораториях изложены в Методических рекомендациях «Серологические методы для диагностики и мониторинга дифтерийной инфекции», утвержденных Департаментом здравоохранения Вологодской области (2012 г.).

Для унификации и повышения эффективности серологического контроля иммунитета предложен алгоритм, включающий:

  1. периодичность серологического мониторинга (не реже 1 раза в 2 года);
  2. использование ИА и определения уровня АТ-АТ в МЕ/мл;
  3. определение степени невосприимчивости обследуемых с учетом сроков сохранения высокоавидных АТ-АТ;
  4. сопоставление серологических данных с результатами изучения циркуляции C.diphtheriae (токсигенных, с «молчащим» геном), что позволит выявлять группы повышенного риска.

Разработан алгоритм микробиологического мониторинга за циркуляцией токсигенных C.diphtheriae с использованием метода ПЦР и определение чувствительности к антибактериальным препаратам.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

  1. На основании данных определения поствакцинальных противодифтерийных антител методом ИФА и его вариантов установлены объективные показатели защищенности детского населения от дифтерии.
  2. Обосновано применение метода ИФА c учетом индекса авидности и определения сроков регрессии высокоавидных антител, для установления вакцинального статуса при серологическом мониторинге иммунитета к дифтерии у детей.
  3. Для мониторинга циркуляции C.diphtheriae и выявления эпидемически значимых штаммов подтверждена необходимость использования метода ПЦР.
  4. Выявленные особенности (доминирование культур с «молчащим» геном токсигенности, выраженная резистентность к антибактериальным препаратам, циркуляция рибо – и биотипов, характерных для эпидемической ситуации) биологических свойств C.diphtheriae, циркулирующих в постэпидемических период и подъема заболеваемости позволяют рассматривать их в качестве основных признаков для прогноза заболеваемости дифтерии у детей.

Внедрение результатов исследования в практику. Результаты работы внедрены в практическую деятельность врачей диагностических центров и микробиологических лабораторий Центров гигиены и эпидемиологии г. Вологды и Вологодской области.

Результаты исследований внедрены в учебный процесс Вологодского филиала ГБОУВПО «Северо-Западный Государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова» Министерства здравоохранения РФ.

Материалы диссертации представлены в «Руководстве по клинической лабораторной диагностике» (Раздел: Коринебактерии) М. 2011.





Разработана технология получения контрольных образцов для определения индекса авидности противодифтерийных антитоксических антител с помощью ИФА тест-системы, выпускаемой филиалом ФГУП НПО «Микроген» Минздравсоцразвития Россия Пермское НПО «Биомед» №09/600/22116.

Составлены методические рекомендации «Серологические методы для диагностики и мониторинга дифтерийной инфекции». Утверждены Департаментом здравоохранения Вологодской области, 2012 г.

Апробация работы. По теме диссертации опубликовано: 15 научных работ, в том числе 3 – в изданиях, рецензируемых ВАК.

Основные результаты исследований доложены и обсуждены на российских и международных семинарах, конгрессах и конференциях в 2006-2012 гг.: 7 февраля 2006 г. НИИЭМ им. Пастера, СПб, заседание общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов в Санкт-Петербурге и Ленинградской области; 26 мая 2007 г. ГОУ ДПО СПб МАПО Росздрава. Всероссийская научная конференция «Современные проблемы медицинской микробиологии» (Хлопинские чтения); 26 февраля 2008 г. НИИЭМ им. Пастера, СПб, заседание общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов в Санкт-Петербурге и Ленинградской области; 2-4 июня 2008 г. Четвертая международная конференция, посвященная 85-летию Санкт-Петербургского НИИЭМ имени Пастера и 120-летию Парижского института Пастера; 16-17 декабря 2009 г. Вологда. Пленум, посвященный 65-летию Российской академии медицинских наук и 130-летию со дня рождения академика АМН СССР А.Н. Сысина; 08 июня 2010 г. НИИЭМ им. Пастера, СПб, заседание общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов в Санкт-Петербурге и Ленинградской области; 15 сентября 2010 г. Вологда. Научно-практическая конференции ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Вологодской области»; 14 сентября 2012 г. Вологда. Научно-практическая конференции ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Вологодской области».

Личный вклад автора. Собраны, изучены и проанализированы аналитические данные о профилактических прививках обследованных детей, и клинический статус.

Основные результаты получены лично автором, отдельные фрагменты выполнены совместно на базе лаборатории бактериальных капельных инфекций ФБУН НИИЭМ имени Пастера. Выделение штаммов C. diphtheriae, сбор сывороток от больных и здоровых лиц проведен в микробиологических лабораториях Центров гигиены и эпидемиологии г. Вологды и Вологодской области, а также лично автором.

Микробиологические, серологические, иммунохимические, экспериментальные исследования, а также компьютерный и статистический анализ данных проведен автором в лаборатории бактериальных и паразитарных инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Вологодской области» и в лаборатории бактериальных капельных инфекций ФБУН НИИЭМ им. Пастера.

Структура и объем диссертации. Основной текст диссертации изложен на 132 страницах машинописного текста и состоит из введения, аналитического обзора литературы, характеристики материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, приложения.

Диссертация иллюстрирована 9 таблицами и 15 рисунками. Список литературы содержит 102 источника отечественных авторов и 250 источников зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследований

В соответствии с целью и задачами исследования использован следующий материал и применены методы, представленные в таблице 1.

Таблица 1.

Объем проведенных исследований различными методами

Методы Объем
  1. Бактериологический:
    1. Изучение характеристик циркулирующих штаммов C.diphtheriae.
    2. Сравнение методов определения токсигенности штаммов C.diphtheriae.
170 шт. 75 шт.
  1. Иммунологический:
    1. Сравнительная оценка методов РПГА, ИФА и его вариантов для определения защищенности от дифтерии.
    2. Оценка уровней АТ-АТ по международным стандартам.
    3. Выделение групп «риска» по возрасту.
    4. Оценка эффективности теста определения авидности антитоксических антител.
    5. Изучение динамики показателей защищенности от дифтерии
203 ОСК 110 ОСК 189ОСК. 110 ОСК 122 ОСК
  1. Молекулярно-генетический: ПЦР и риботипирование
85шт.


Pages:   || 2 | 3 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.