WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 |

Популяционно-генетический анализ полиморфизма гена метилентетрагидрофолатредуктазы при дефектах невральной трубки в казахской популяции

-- [ Страница 1 ] --

Представлены сведения о предстоящей защите диссертации

Махмутова Жанар Спатаевна

«Популяционно-генетический анализ полиморфизма гена метилентетрагидрофолатредуктазы при дефектах невральной трубки в казахской популяции»

03.00.15 генетика

медицинские науки

Д 001.016.01

ГУ Медико-генетический научный центр РАМН

115478, Москва, ул. Москворечье, д.1

Тел.111-85-80

E-mail: genreprlab@mtu-net.ru

Предполагаемая дата защиты диссертации 14 мая 2007 года

На правах рукописи

МАХМУТОВА ЖАНАР СПАТАЕВНА

ПОПУЛЯЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА МЕТИЛЕНТЕТРАГИДРОФОЛАТРЕДУКТАЗЫ ПРИ ДЕФЕКТАХ НЕВРАЛЬНОЙ ТРУБКИ В КАЗАХСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ

03.00.15 - генетика

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва 2007

Работа выполнена в лаборатории медицинской генетики Научного Центра акушерства, гинекологии и перинатологии Министерства здравоохранения Республики Казахстан

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Г. С. Святова

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор В. С. Журков

кандидат медицинских наук А. Н. Прытков

Ведущая организация:

ГОУВПО Российский государственный медицинский

университет, г. Москва

Защита диссертации состоится «_____» __________ 2007 г. в _____ часов на заседании Диссертационного совета Д 001.016.01 при ГУ Медико-генетическом научном центре РАМН по адресу: 115478, г. Москва, ул. Москворечье, д.1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ МГНЦ РАМН

Автореферат разослан «_______» __________________ 2007 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор биологических наук, профессор Л. Ф. Курило

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Дефекты невральной трубки (ДНТ) являются одними из наиболее тяжелых и частых врожденных пороков развития (ВПР), вносящих значимый вклад в показатели детской заболеваемости, инвалидизации и смертности [Wenstrom K. D., 2000; Oakeshott P. et al., 2003; Watson K. et al., 2005].

Согласно результатов функционирования мониторинговых систем частота ДНТ в различных популяциях варьирует от 0,2 до 10 на 1000 новорожденных в год, в среднем составляя 1 ‰ [Botto L. D., et al.; 1999; Missmer S.A., 2005]. Причины возникновения большинства ДНТ до настоящего времени не установлены. По литературным данным в 10% ДНТ являются симптомами хромосомной или моногенной патологии, наиболее частыми из которых являются трисомии 18, 13 и 21, синдромы Меккеля-Грубера, Уокера-Варбурга, криптофтальмоза, Робертса и пр.[Schinzel A., 1984; Kennedy et al., 1998; O’Raily, 2000]. На развитие ДНТ может влиять большое количество факторов: этногеографические и репродуктивные особенности популяции, социальные факторы, экстрагенитальная патология матери и пр. [ Felkner M., 2003; Anderson J. L., 2005; Lawrence J. M., 2006; Edwards M. J., 2006]. В 80% случаев ДНТ имеют мультифакториальную природу, то есть возникают при наличии генетической предрасположенности и дополнительного внешнего фактора [Volcik K. A., 2000].

В результате ряда исследований установлено, что у беременных с ДНТ плода наблюдается повышение в крови уровня аминокислоты гомоцистеина, связанное с нарушением функции фермента 5,10-метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR) [Fodinger M., 2000; Lee Y.S., 2006; Martin Y.N., 2006]. При снижении функции MTHFR нарушается доставка и метаболизм потребляемой организмом фолиевой кислоты. Недостаток фолиевой кислоты, метаболиты которой действуют как коферменты в процессах биосинтеза аминокислот, ДНК и РНК, приводит к развитию гипергомоцистеинемии и нарушению митотической активности клеток в критических стадиях эмбриогенеза, что, возможно, способствует развитию различных ВПР плода, в том числе ДНТ [Haiden N.,2006].

К снижению функции фермента MTHFR и развитию гипергомоцистеинемии могут приводить мутации в гене MTHFR, расположенном на коротком плече 1 хромосомы (1р36.3) [Isotalo P.A.,2000; Dutta S, 2005]. Наиболее значимыми являются две миссенс-мутации в гене MTHFR – С677Т и А1298С, носительство которых по данным многих исследователей способствует снижению функции фермента MTHFR в среднем на 35-60% от нормального значения [Rosenberg, N., 2002; Kolling K., 2004; Parle-McDermott A., 2006]. Различные популяции мира имеют выраженную генетическую гетерогенность по частоте генотипов и аллелей С677Т и А1298С полиморфизмов гена MTHFR [Guitierrez R. J.I., 2003; Jerbi Z., 2005; Jaaskelainen E., 2006]. Данные по изучению полиморфных вариантов гена MTHFR не позволяют сделать окончательных заключений о роли мутаций MTHFR в этиопатогенезе ДНТ. В ряде популяций была установлена роль неблагоприятных генотипов С677Т и А1298С полиморфизмов MTHFR в развитие ДНТ, однако имеются популяционные исследования с противоположным результатом [Brody L.C., 2002; De Marco P., 2003; Dutta S., 2005; Boyles A. L., 2006].



Установление частоты ДНТ в Республике Казахстан, определение популяционных факторов риска их развития, а также изучение полиморфизма гена MTHFR как возможного генетического фактора предрасположенности к ДНТ даст возможность уточнить эпидемиологические особенности и молекулярно-генетические аспекты этиопатогенеза ДНТ. Кроме того, результаты исследования позволят оптимизировать медико-генетическое консультирование при ДНТ путем формирования групп риска и разработки эффективных мер первичной профилактики, что в конечном итоге будет способствовать снижению частоты ДНТ в популяциях Республики Казахстан.

Цель работы: Оценить генетический вклад полиморфизма гена метилентетрагидрофолатредуктазы для оптимизации медико-генетического консультирования при дефектах невральной трубки плода в казахской популяции.

Задачи исследования:

  1. Изучить по данным Национального Генетического Регистра Республики Казахстан частоту, структуру и этногеографические особенности распространения ДНТ, оценить их вклад в показатели мертворождаемости, ранней неонатальной и перинатальной смертности
  2. Провести клинико-генетический анализ семей с ДНТ и определить прогностические факторы риска развития ДНТ в популяциях Республики Казахстан
  3. Изучить популяционно-генетические особенности распределений частот аллелей и полиморфных вариантов гена MTHFR в казахской популяции.
  4. Определить клинико-диагностическую значимость полиморфизмов С677Т и А1298С гена MTHFR для риска развития ДНТ в казахской популяции.
  5. Оптимизировать медико-генетическое консультирование семей в зависимости от генотипа родителей для профилактики и эффективной пренатальной диагностики ДНТ плода.

Научная новизна: Впервые по данным НГР РК определена частота и структура, определены этногеографические особенности распространения ДНТ в популяциях Республики Казахстан. Оценен вклад ДНТ в показатели мертворождаемости, ранней неонатальной и перинатальной смертности. Впервые проведен клинико-генетический анализ семей, отягощенных ДНТ плода, выделены основные факторы риска развития ДНТ в популяциях Казахстана.

Впервые описаны популяционно-генетические характеристики распределений частот аллелей и генотипов гена MTHFR, определены показатели генетической гетерогенности казахской популяции по полиморфизмам С677Т и А1298С. Впервые изучена клинико-диагностическая значимость аллельных полиморфизмов С677Т и А1298С гена MTHFR в возникновении ДНТ и установлена ассоциация носительства гаплотипов СТсс, ТТаа и ТТас гена MTHFR с развитием ДНТ высокой локализации в казахской популяции.

Научно-практическая значимость: Впервые осуществлен генетический мониторинг ДНТ в системе Национального Генетического Регистра в различных регионах Республики Казахстан. Впервые для популяции РК выделены факторы риска развития ДНТ, на основании которых разработан клинико-диагностический алгоритм прогнозирования ДНТ, что позволит сформировать группы риска и провести раннюю профилактику ДНТ.

Впервые определена информативность и прогностическая значимость С677Т и А1298С полиморфизмов гена MTHFR для оценки риска развития ДНТ в казахской популяции.

Впервые определена клинико-диагностическая значимость гаплотипов СТас, СТсс, ТТаа и ТТас гена MTHFR для развития ДНТ в казахской популяции. Впервые выявлена ассоциация носительства гаплотипов ТТаа и ТТас гена MTHFR с развитием ДНТ высокой локализации в популяции казахов, что будет иметь значение для прогнозирования развития ДНТ тяжелой степени.

Впервые разработан алгоритм периконцепционной профилактики ДНТ, оптимизирована пренатальная диагностика и медико-генетическое консультирование при ДНТ в зависимости от гаплотипов обследуемых для снижения частоты ДНТ в Республике Казахстан

Положения, выносимые на защиту:

  1. Установлены факторы риска развития, частота, динамика и структура, изучены этногеографические особенности распространения ДНТ в популяциях Республики Казахстан.
  2. Выявлены популяционные частоты генотипов и аллелей и установлен средний уровень гетерозиготности по С677Т и А1298С полиморфизмам гена MTHFR в казахской популяции. Выявлены значимые отличия распределения генотипов и аллелей по С677Т полиморфизму в сравнении с теоретическим равновесием Харди-Вайнберга и установлена низкая частота аллеля Т и генотипа ТТ в популяции казахов в отличие с изученными ранее азиатскими и европейскими популяциями.
  3. Определена клинико-генетическая значимость носительства различных генотипов и гаплотипов С677Т и А1298С полиморфизмов гена MTHFR в развитие ДНТ в казахской популяции. Установлена положительная корреляция между носительством плодом наиболее неблагоприятных гаплотипов MTHFR с развитием ДНТ высокого уровня локализации.
  4. Разработан клинико-диагностический алгоритм прогноза, периконцепционной профилактики, пренатальной диагностики и медико-генетического консультирования при ДНТ для популяций Республики Казахстан.

Апробация работы: Материалы диссертации доложены на международной научной конференции «Современное состояние проблем и достижений в области генетики и селекции», г. Алматы, март 2003, Республиканской научно-практической конференции «Современные аспекты перинатологии», г. Алматы, ноябрь 2003 г., Республиканской научно-практической конференции «Актуальные проблемы перинатальной неврологии», г. Алматы, июнь 2003г., Международной научно-практической конференции «Новые лечебно-диагностические технологии в акушерстве, гинекологии и перинатологии», г. Караганда, май 2004г., V съезде Российского общества медицинских генетиков, г. Уфа, май 2005г.





Публикации: Результаты диссертации представлены в 17 печатных работах. Получен патент Республики Казахстан № 2006/1442.1 от 28.12.2006 г. «Способ прогнозирования риска развития дефектов невральной трубки плода в казахской популяции».

Структура и объем диссертации: Диссертация изложена на 161 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов и обсуждения собственных исследований, заключения, выводов, списка использованных источников и приложений. Список литературы включает 247 источников, из них 57 отечественных и 190 иностранных. Диссертация иллюстрирована 26 таблицами, 18 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы исследования. Материалом для изучения частоты и структуры ДНТ, а также для выявления факторов риска возникновения ДНТ послужили «Персональные карточки ребенка» Национального Генетического Регистра Республики Казахстан (НГР РК). Проанализированы исходы 1 млн 619 тысяч 14 родов, персонифицирована информация о 986 новорожденных с ДНТ за период с 1998 по 2005 гг. Материалом для проведения молекулярно-генетического исследования на носительство мутаций С677Т и А1298С гена MTHFR использованы образцы ДНК 30 больных детей с различными формами ДНТ, 84 матерей и 39 отцов из отягощенных семей. Материалом для изучения популяционно-генетических особенностей полиморфизма гена MTHFR послужили образцы ДНК 73 мужчин и 230 женщин человек, отобранные методом случайной выборки. В качестве контрольной группы послужили образцы ДНК 100 женщин и 50 мужчин, имеющих двух и более здоровых детей. Все обследуемые принадлежали казахской национальности.

Методы исследования. Выделение ДНК из 5 мл периферической крови обследуемых проведено солевым методом с последующей хлороформно-фенольной очисткой. Для анализа мутаций С677Т и А1298С гена MTHFR использован диагностический набор праймеров и рестриктаз производства ООО "Центр молекулярной генетики" (г. Москва, Россия), рассчитанный на анализ 100 образцов ДНК.

Статистическая обработка результатов. Математическая обработка полученных данных проведена на ПЭВМ стандартными методами статистической обработки с использованием программного обеспечения Microsoft Excel'2000 и с применением пакетов статистических программ BIOSYS-1 [Swofford and Selinger, 1981] и “Statistica v.6.0”. Величину относительного риска OR (odds ratio), выражающего силу ассоциаций рассчитывали по стандартной методике [Сергиенко В.И., Бондарева И.Б., 2000]. При создании прогностической таблицы факторов риска развития ДНТ использована методика неоднородной последовательной статистической процедуры распознавания Вальда [Вальд А., 1960].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Впервые проведено комплексное изучение тяжелых врожденных пороков развития – дефектов невральной трубки плода в Республике Казахстан, включающее определение эпидемиологических особенностей распространения ДНТ в популяциях РК, выделение возможных факторов риска развития ДНТ на основании полного клинико-анамнестического анализа отягощенных семей, а также клинико-диагностической значимости носительства различных генотипов и гаплотипов С677Т и А1298С полиморфизмов гена MTHFR для развития ДНТ в казахской популяции в целях разработки алгоритма прогноза, периконцепционной профилактики и пренатальной диагностики для оптимизации медико-генетического консультирования при ДНТ в Республике Казахстан.

Частота и структура ь ДНТ в Республике Казахстан

В Республике Казахстан за период 1998-2005 гг удельный вес ДНТ в структуре ВПР составил 4,7±0,14%, средняя частота ДНТ составила 0,61±0,02 на 1000 новорожденных. Отмечена широкая вариабельность ежегодной частоты ДНТ в популяциях республики. Высокая частота ДНТ наблюдается в Восточно-Казахстанской (ВКО) (0,82±0,08‰) и Жамбылской (0,81±0,08‰) областях (р<0,05). Достоверно низкая частота ДНТ наблюдается в Западно-Казахстанской (ЗКО) (0,39±0,08‰) и Павлодарской областях (0,25±0,06‰ ) (р<0,05).

 Частота различных типов ДНТ по данным НГР РК с 1998-2005 гг (на 1000-0

Рис. 1. Частота различных типов ДНТ по данным НГР РК с 1998-2005 гг (на 1000 новорожденных).

Динамика частоты ДНТ в целом по республике имеет тенденцию к росту за счет высокой частоты СМГ в структуре ДНТ (рис. 1). В структуре мертворождаемости от ВПР удельный вес ДНТ составил 26,6±1,5%, в структуре неонатальной и перинатальной смертности - 4,8±0,4% и 11,1±0,6%, соответственно. Установлено, что ДНТ ежегодно занимают первое место в структуре мертворождаемости и третье место в структуре перинатальной смертности от ВПР, уступая ВПС (30%) и МВПР (15%).

Этнический состав больных детей составил: казахи - 70,5±1,5%, русские - 15,9±1,2% и представители прочих национальностей - 13,6±1,1%. Частота встречаемости ДНТ в этнических группах составила у казахов - 0,61±0,02 на 1000 рождений (1:1630), у русских – 0,55±0,04 (1:1814), прочих национальностей – 0,51±0,04 на 1000 новорожденных (1:1979). Достоверного превышения частоты ДНТ в какой-либо этнической группе не обнаружено (р>0,05).

Клинико-генетический анализ отягощенных семей и формирование групп риска по развитию ДНТ в популяции РК.



Pages:   || 2 | 3 | 4 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.