WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 |

Структурная реорганизация нерва при удлинении конечности высокодробной автоматической дистракцией (экспериментально-морфологическое исследование)

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

ВАРСЕГОВА

ТАТЬЯНА НИКОЛАЕВНА

СТРУКТУРНАЯ РЕОРГАНИЗАЦИЯ НЕРВА

ПРИ УДЛИНЕНИИ КОНЕЧНОСТИ

ВЫСОКОДРОБНОЙ АВТОМАТИЧЕСКОЙ ДИСТРАКЦИЕЙ

(экспериментально-морфологическое исследование)

03.00.25. – гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат

Диссертация на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Астрахань – 2007

Работа выполнена в научном экспериментально-клиническом отделе морфологических исследований «Федерального государственного учреждения науки Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» имени академика Г.А. Илизарова Росздрава» и ПНИЛ «Управляемые гисто- и органогенезы» Курганского филиала Южно-уральского центра РАМН.

Научный руководитель: доктор медицинских наук,

Щудло Наталья Анатольевна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, доцент

Родзаевская Елена Борисовна

доктор биологических наук, доцент

Фельдман Бронислав Владимирович

Ведущая организация Тюменская государственная медицинская академия Росздрава

Защита диссертации состоится 4 мая 2007 года в 14-00 часов на заседании диссертационного совета ДМ 212.009.01 при Астраханском государственном университете по адресу: 414000, г.Астрахань, пл. Шаумяна, 1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного университета

Автореферат разослан года

Ученый секретарь диссертационного совета, Нестеров Ю.В.
  1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Реабилитация пациентов с врожденными и приобретенными укорочениями конечностей - одна из важнейших медико-социальных проблем [Шевцов В.И., Попков А.В., 1998]. Этот вид патологии относится к числу распространенных и не имеет тенденции к снижению [Волков М.В., Дедова В.Д., 1980; Андрианов В.Л., Мирзоева И.И., 1986; Андрианов В.Л., Веселов Н.Г., Мирзоева И.И., 1988; Калякина В.И., 1988; Попков А.В., Бурлаков Э.В., Попков Д.А., 1996; Шевцов В.И., Попков А.В., 1998; Попков А.В., 1998]. В современной ортопедии задача коррекции длины сегмента конечности решается хирургическими средствами. Предпочтение отдается методу чрескостного остеосинтеза, разработанному Г. А. Илизаровым [Шрейнер А.А., 1982; Попков А.В., 1990]. Он предусматривает нарушение целостности кости, точное сопоставление отломков, их фиксацию в аппарате и последующее контролируемое дозированное взаимоудаление - дистракцию, осуществляемую аппаратом. Напряжение растяжения, возникающее в тканях конечности при дистракции, возбуждает и поддерживает их регенерацию и рост [Диплом № 355 (СССР); Илизаров Г.А., 1984]. Активность компенсаторно-приспособительных процессов определяется множеством факторов, в том числе режимом удлинения. Среди параметров режима удлинения важнейшими являются скорость (суточный темп) и дробность (количество дистракционных перемещений за сутки) [Илизаров Г.А., 1984].

Постулаты теории аксоплазматического тока [Weiss P, Hiscoe H.B., 1948], а также широко известные данные о средней скорости роста регенерирующих аксонов (1 мм в сутки), легли в основу представлений об оптимальном темпе дистракции, которые подтвердились в экспериментах по удлинению конечностей животных и в клинической практике [Штин В.П., Никитенко З.Т., 1975; Сидоренко О.К., Лебединцев Е.А., 1983; Шрейнер А.А., Ерофеев С.А., Чиркова А.М., 1985]. При более высоком темпе дистракции (2-3 мм за 1 прием) наблюдались глубокие патологические изменения во всех тканях, в том числе в периферических нервах [Смирнова Л.А. и др., 1972; Мажара Н.Н., 1974; Котельников Г.П., 1977; Волкова А.М. и др. 1988].

Представления об оптимальном ритме дистракции различны. В.И. Стецула с соавт. (1984) считали, что суточное удлинение необходимо проводить одномоментно. По мнению Г.А. Илизарова (1984), ритм дистракции должен приближаться к естественному росту, что послужило основанием для проведения экспериментов с повышенной дробностью дистракции [Шеховцова Н.С., Шрейнер А.А., 1987; Илизаров Г.А., Ерофеев С.А., Чиркова А.М., 1991; Сайфутдинов М.С. и др., 1993, 1996; Илизаров Г.А. и др., 1995; Чикорина К.Н., Ерофеев С.А., Шрейнер А.А., 2000; Шевцов В.И. и др., 1997, 2003], в том числе с применением автоматического дистрактора [Пат. 4615338 США МКИ 61 Г 5/04], обеспечивающего удлинение 1 мм в сутки за 60 включений (разовое удлинение 0,017 мм).



Получены сведения, что именно высокодробная круглосуточная дистракция создаёт наиболее благоприятные условия для нервов конечностей – по сравнению с режимами «1 мм за 1 приём» и «1 мм за 4 приёма» [Илизаров Г.А. и др., 1995]. Остается неизученным вопрос о состоянии периферических нервов при автодистракции с суточным удлинением 1 мм, осуществляемым не за 24, а за 12 часов, что представляется актуальной задачей, как в практическом, так и теоретическом отношении.

Один из недостатков удлинения конечности по Г.А. Илизарову - длительность лечения, связанная с ограничениями суточного темпа. Профессором В.И.Шевцовым выдвинута идея экспериментального изучения повышенного темпа высокодробной дистракции. В результате исследований установлено, что удлинение со скоростью 3 мм в сутки за 180 приемов позволяет сократить сроки органотипической перестройки костного регенерата [Шевцов В.И. и др., 2006]. Влияние такого режима дистракции на периферические нервы неизвестно.

1.2 Цель и задачи исследования. Цель работы – изучение особенностей структурной реорганизации периферического нерва при удлинении конечности под влиянием высокодробной автоматической дистракции.

Для достижения цели были поставлены задачи:

  1. Изучить особенности общегистологического строения и морфометрические показатели большеберцового нерва интактных собак.
  2. На экспериментальной модели удлинения голени собаки проанализировать структурные проявления деформации растяжения большеберцового нерва при дистракционном остеосинтезе.
  3. Оценить степень реактивно-деструктивных изменений нервных волокон при удлинении с темпом 1 мм за 60 приёмов в течение 12 часов и с повышенным темпом 3 мм за 180 включений автодистрактора в течение суток.
  4. Определить основные морфологические эквиваленты нарушения функции удлиняемого нерва при высокодробных режимах дистракции.
  5. Выявить особенности изменений эпиневральной и эндоневральной васкуляризации, а также численно-размерного состава нервных проводников удлиняемого нерва.

1.3. Научная новизна. Впервые с применением комплекса современных методов гистологического исследования (световая и электронная микроскопия, гистохимия, компьютерная морфометрия) изучена структурная реорганизация периферического нерва удлиняемой конечности при новых режимах высокодробной дистракции (темп 1 мм за 60 приёмов в течение 12 часов и повышенный темп 3 мм за 180 включений автодистрактора в течение суток). Определены структурные корреляты функциональных нарушений нерва при высокодробных режимах дистракции. На основании данных количественной и аналитической морфологии расширены и углублены представления о закономерностях перестройки популяции нервных волокон периферического нерва в условиях дистракционного остеосинтеза. Получены новые данные об изменениях эпиневральной и эндоневральной васкуляризации при удлинении голени у собак. Представлены новые сведения о закономерностях ремоделирования сегментов миелина при адаптации периферического нерва зрелых животных к увеличению длины конечности.

1.4. Теоретическая и практическая значимость. Результаты качественного и количественного исследования интактных большеберцовых нервов собак могут служить нормативными данными в опытах по апробации различных режимов дистракционного остеосинтеза и контролем при оценке глубины сдвигов соответствующих показателей при различных экспериментах. Полученные новые знания о структурной реорганизации большеберцовых нервов в разных условиях высокодробного удлинения с применением автодистрактора послужат теоретическим обоснованием выбора оптимального режима дистракционного остеосинтеза, в том числе и в клинике. Результаты исследований служат основой для разработки рациональных стратегий, направленных на профилактику неврологических осложнений при оперативном удлинении конечностей, замещении костных и мягкотканных дефектов методом дистракционного остеосинтеза. Некоторые положения диссертации относятся к фундаментальным и представляют теоретический интерес.

1.5. Апробация работы. Материалы диссертации доложены на IV зауральском фестивале научно-исследовательского, технического и прикладного творчества молодежи и студентов курганской области (г. Курган, май 2002 г.); на международной конференции: «Фундаментальные и прикладные проблемы гистологии. Гистогенез и регенерация тканей» (г. Санкт-петербург, 8 апреля 2004 г.); на международной научно-практической конференции «Морфофункциональные аспекты регенерации и адаптационной дифференцировки структурных компонентов опорно-двигательного аппарата в условиях механических воздействий» (г. Курган, 2004); на всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Молодые ученые: новые идеи и открытия» (г. Курган, ФГУН РНЦ «ВТО», 14-16 июня 2006 г.)





1.6. Реализация результатов исследования. Результаты проведённых исследований используются при выполнении плановых научно-исследовательских работ в Российском научном центре "Восстановительная травматология и ортопедия" имени академика Г.А.Илизарова, в ПНИЛ “Управляемые гисто- и органогенезы” Курганского филиала Южно-Уральского научного центра РАМН, включены в программу кафедры травматологии и ортопедии ФПК и ППС Тюменской государственной медицинской академии.

1.7. Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, 2 из них в рецензируемых изданиях. Оформлено и внедрено два рационализаторских предложения: «Способ изготовления криостатных срезов периферических нервов малого диаметра» (удостоверение № 3/2001, РНЦ «ВТО» им. акад. Г.А. Илизарова; «Способ экспресс-визуализации аксонов для интраоперационной диагностики» (удостоверение № 85/2002 РНЦ «ВТО» им. акад. Г.А. Илизарова).

1.8. Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. В процессе удлинении конечности методом дистракционного остеосинтеза по Г.А. Илизарову в периферических нервах развивается деформация растяжения, инициирующая адаптационный рост нервных волокон, который продолжается и после прекращения дистракции до восстановления исходного резерва эластичности нерва.

2. Высокодробный режим дистракции с разовым удлинением 17 мкм, обеспечивает высокую структурную сохранность нервных проводников удлиняемого нерва даже при повышении темпа до 3 мм в сутки.

3. Раннее формирование и последующее удлинение вставочных сегментов миелина, выявленное при изученных режимах высокодробной дистракции, является эффективным механизмом поддержания гомеоморфоза нервных проводников.

1.9. Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 167 страницах машинописного текста (без приложения). Состоит из введения, 6 глав, заключения, выводов. Работа содержит 94 иллюстрации, 18 таблиц (не считая таблицы приложения). В списке литературы 145 источников, из них отечественных авторов - 96, зарубежных - 49. Приложение включает 1 таблицу и 2 рисунка. Диссертационная работа выполнена по плану НИР ФГУН «РНЦ «ВТО» имени академика Г.А. Илизарова Росздрава», № госрегистрации 01.2.00 3 05576.

  1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование выполнено на 29 взрослых беспородных собаках, близких по возрасту (1-3 года) и массе тела (14-16 кг). Эксперименты проведены совместно с д.м.н. С.А. Ерофеевым на 24 собаках, которым после остеоклазии берцовых костей осуществляли удлинение голени методом дистракционного остеосинтеза, разработанного академиком Г.А. Илизаровым. Операции проводили в асептических условиях в специальной операционной. В обязательном порядке животным проводили премедикацию путём внутримышечного введения препаратов морфина 1% - 1 мл или рометара 2% - 1 мл, димедрола 1% - 2 мл, атропина 0,1% - 0,5 мл, аминазина 2,5% - 2 мл. Через 20-30 минут после премедикации давали вводный наркоз 2,5% раствором тиопентала натрия (внутривенно от 1 до 4 мл). Волосяной покров правой голени тщательно выстригали. Животное в состоянии наркотического сна переносили в операционную. Через систему для внутривенного капельного введения по мере необходимости добавляли поддерживающие дозы тиопентала натрия. Общее количество раствора тиопентала варьировало от 6 до 15 мл, физиологического раствора - не более 300 мл.

На правую голень накладывали аппарат Илизарова из 3 колец и дуги, с фиксацией проксимального и дистального концов большеберцовой кости двумя парами натянутых перекрещивающихся спиц. Нарушение целостности большеберцовой кости достигали путем флексионной остеоклазии [Илизаров Г.А., Шрейнер А.А., 1979]. Её осуществляли натяжением дополнительной "сгибающей" спицы, проведённой по касательной к кости между средними кольцами аппарата и фиксированной к планке, соединённой с винтовой тягой. Затем удаляли дополнительно проведённые спицы и аппарат для остеоклазии, устраняли угловое смещение отломков, устанавливали растяжные стержни. В части опытов перед остеоклазией, с целью ослабления кости, кортикальный слой по передней поверхности просверливали во фронтальной плоскости спицей Киршнера. Малоберцовую кость ломали в верхней трети натяжением проведённой под неё спицы. После нарушения целостности костей голени между фрагментами создавали условия нейтрального остеосинтеза. Фиксацию костных фрагментов производили аппаратом Илизарова, состоящим из четырех опор. Через 5 дней после операции начинали удлинение голени аппаратом Илизарова с автоматическим приводом [Ерофеев С.А., Шевченко Г.И., 1988; Ерофеев С.А., 1992] конструкции Г.А. Илизарова, А.П. Предеина, В.М. Быкова (1986).

После прекращения дистракции конечность фиксировали в аппарате Илизарова 30 дней до консолидации костного регенерата, затем аппарат снимали и животных наблюдали еще в течение месяца. Содержание животных, оперативные вмешательства и эвтаназию осуществляли согласно приказу МЗ СССР № 755 1977 г. Животных выводили из эксперимента передозировкой барбитуратов в конце дистракции (I серия n=7, II серия n=3), через 30 дней фиксации (I серия n=4, II серия n=3) и через месяц после снятия аппарата (I серия n=4, II серия n=3).

Большеберцовые нервы (ББН) оперированных и контралатеральных конечностей на уровне средней трети голени закрепляли на твердой основе для предотвращения деформации и резецировали, отступая от основы на 5-8 мм с каждого конца (рис. 1). Проксимальные (6) и дистальные (7) фрагменты ББН помещали в жидкий азот. Оставшийся на твердой основе материал фиксировали не менее недели в охлажденной смеси равных объемов 2%-х растворов глутарового и параформальдегидов на фосфатном буфере (рН 7,4) с добавлением 0,1% пикриновой кислоты.



Pages:   || 2 | 3 | 4 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.