WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 |

Нарушение редокс-баланса сперматозоидов и семенной плазмы мужчин при патоспермии

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

БЫКОВА

Мария Валерьевна

НАРУШЕНИЕ РЕДОКС-БАЛАНСА СПЕРМАТОЗОИДОВ И СЕМЕННОЙ ПЛАЗМЫ МУЖЧИН ПРИ ПАТОСПЕРМИИ

03.00.04 - биохимия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Красноярск 2008

Работа выполнена на кафедре биохимии и физиологии человека и животных ГОУ ВПО «Сибирский федеральный университет» и в Центре репродуктивной медицины г. Красноярска

Научный руководитель: кандидат биологических наук,

доцент

Титова Надежда Митрофановна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук

Меньщикова Елена Брониславовна

доктор медицинских наук

Душкин Михаил Иванович

Ведущая организация: Институт биофизики СО РАН

Защита диссертации состоится «___» ______________ 2008 г. в ____часов на заседании диссертационного совета Д 001.034.01 в Государственном учреждении Научно-исследовательском институте биохимии СО РАМН по адресу: 630117, Новосибирск, ул. Академика Тимакова, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного учреждения Научно-исследовательского института биохимии СО РАМН.

Автореферат разослан «___» _____________ 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук Русских Г.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Мужская репродуктивная система, являясь одной из наиболее чувствительных и ранимых в организме, подвергается воздействию целого ряда неблагоприятных факторов, которые, влияя на эндокринные железы, центральную нервную систему и непосредственно на гонады, вызывают дистрофические изменения в семенных канальцах и межуточной ткани яичек. Это приводит к снижению оплодотворяющей способности эякулята и, как следствие, к нарушению репродукции в супружеской паре (бесплодию, невынашиванию беременности, рождению неполноценного потомства). В литературе последнего десятилетия появляются данные, что важным патогенетическим звеном при развитии мужской инфертильности (независимо от этиологии) является наличие окислительного стресса (Sharma RK. et al, 1999; Gil-Guzman E. et al, 2001; Sikka S., 2001).

В эякуляте источниками образования АФК являются как сами сперматозоиды (при неправильной дифференциации клеток во время стадий сперматогенеза), так и лейкоциты. Генерация АФК в сперме может иметь как позитивные последствия, так как во время капацитации и акросомальной реакции АФК подготавливают спермий для связывания и оплодотворения яйцеклетки (deLamirande Е. et al, 1997; O’Flaherty CM. et al, 1999), так и негативные, приводя к снижению жизнеспособности клетки. Положительный эффект связан с умеренной продукцией АФК, тогда как гиперпродукция приводит к неблагоприятными последствиям. Кроме того, окислительный стресс в эякуляторных спермиях может быть вызван активацией синтеза АФК в комбинации с бедностью антиоксидантных компонентов в семенной плазме. Нарушение редокс-баланса может быть важной причиной мужского бесплодия (Sharma RK. et al, 1999; Gil-Guzman E. et al, 2001; Sikka S., 2001).

В то же время механизмы развития ОС, его выраженность при различных видах патоспермии, а также функциональная активность АОС в изучаемой нами литературе не имеют достаточного освещения. В немногочисленных работах, посвященных исследованию антиоксидантного статуса при мужском бесплодии, состояние АОС больных оценивается в большинстве случаев по активности СОД и ГПО либо по концентрации одного из продуктов ПОЛ, что не может дать полноценного представления о состоянии окислительно-восстановительного гомеостаза.

Комплекс лечебных мероприятий при мужском бесплодии включает как медикаментозное консервативное лечение, так и хирургическое вмешательство при тяжелых формах патологии. В последнее время в практику терапии идиопатического бесплодия внедряются методы лечения, обеспечивающие антирадикальную защиту органа и организма в целом. Чаще в качестве терапии антиоксидантами применяются витамины Е, С, карнитин и др. (Rolf C. et al, 1999; Keskes-Ammar I. et al, 2003).

Приведенные данные свидетельствуют об актуальности проблемы и целесообразности проведения исследований по изучению особенностей развития окислительного стресса и состояния АОС при различных видах нарушения сперматогенеза.

Цель исследования

Выявить закономерности изменения прооксидантного и антиоксидантного статуса сперматозоидов и семенной плазмы у мужчин с различными типами нарушения сперматогенеза.

Задачи исследования

  1. Изучить интенсивность процессов перекисного окисления липидов в спермиях и семенной плазме у мужчин при нормозооспермии и при нарушении сперматогенеза.
  2. Исследовать состояние антиоксидантной системы семенной плазмы и спермиев у мужчин при патоспермии и нормозооспермии.

3. Установить характер взаимосвязи между физиологическими параметрами и редокс-балансом эякулята и его изменение в зависимости от вида патоспермии.



Научная новизна и теоретическая значимость

Впервые при нарушении нормального сперматогенеза проведена оценка интенсивности ПОЛ: дифференцированно исследовано содержание диеновых конъюгатов и малонового диальдегида в спермиях и семенной плазме у мужчин. Впервые у мужчин при патоспермии проведено комплексное исследование внутриклеточного и экстрацеллюлярного звена АОС по показателям супероксиддисмутазы, каталазы, восстановленного глутатиона, глутатионпероксидазы, глутатион-S-трансферазы, глутатионредуктазы и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. Установлено, что у мужчин при нарушении сперматогенеза по сравнению с нормозооспермией в семенной плазме и спермиях происходит интенсификация процессов перекисного окисления липидов и снижение мощности антиоксидантной защиты.

Вычленены и охарактеризованы достоверно значимые различия в состоянии редокс-баланса у мужчин с разными формами нарушений сперматогенеза. Установлено, что лимитирующим фактором при развитии разных типов патоспермии является нарушение различных звеньев антиоксидантной защиты.

Предложен коэффициент, позволяющий оценить соотношение про- и антиоксидантных процессов как в спермиях, так и в семенной плазме.

Впервые установлены взаимосвязи между физиологическими параметрами эякулята с одной стороны, содержанием продуктов ПОЛ и активностью антиоксидантной защиты с другой стороны и их изменения в зависимости от вида патоспермии.

Материалы диссертации используются при чтении курсов: «Биохимия», «Биохимия тканей» студентам Сибирского федерального университета, обучающимся по специальности «Биохимия». Методики, изложенные в диссертации, включены в разделы большого практикума по биохимии на кафедре биохимии и физиологии человека и животных СФУ, а также используются студентами при выполнении курсовых и дипломных работ.

Практическая значимость

Исследование функциональной активности антиоксидантной системы и продуктов липидной пероксидации позволяет оценить степень тяжести окислительного стресса при патоспермии. В процессе исследования установлено, что максимальная депрессия антиоксидантной способности семенной плазмы отмечена при тератоастенозооспермии, тогда как в спермиях – при тератозооспермии.

Изучение состояния антиоксидантной системы семени у мужчин при нарушении сперматогенеза позволяет своевременно принимать меры, направленные на коррекцию окислительно-восстановительного гомеостаза. Кроме того, оценка тяжести ОС как в спермиях, так и в семенной плазме у каждого конкретного мужчины имеет важное значение с точки зрения прогноза развития дальнейших осложнений, что в конечном итоге влияет на оплодотворяющую способность спермиев и развитие эмбриона из генетического материала сперматозоидов.

Результаты исследования антиоксидантного статуса семени могут быть использованы при дифференциальной диагностике мужского идиопатического бесплодия (бесплодия неясного генеза). Пациентам с выраженным ОС рекомендуется принимать антиоксидантную терапию, позволяющую предотвратить утяжеление патологии.

Результаты проведённых исследований внедрены в практику работы Центра репродуктивной медицины (г. Красноярск).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Независимо от вида патоспермии по сравнению с нормозооспермией у мужчин происходит интенсификация процессов ПОЛ как в семенной плазме, так и в спермиях.

2. Патоспермия сопровождается снижением активности большинства антиоксидантных ферментов (каталазы, глутатионпероксидазы, глутатион-S-трансферазы) и содержания восстановленного глутатиона в спермиях и семенной плазме на фоне повышения активности супероксиддисмутазы.

3. Буферная емкость антиоксидантной системы семенной плазмы превышает таковую у сперматозоидов.

4. Для патоспермии характерна отрицательная корреляционная взаимосвязь интенсивности процессов ПОЛ с подвижностью спермиев и положительная с количеством аномальных форм сперматозоидов.

Апробация работы. Основные положения и результаты исследования обсуждены на: Межрегиональной научно-практической конференции "Объединение субъектов Российской Федерации и проблемы природопользования в Приенисейской Сибири" (Красноярск, 2005); Всероссийской научно-практической конференции Российской ассоциации репродукции человека (Чебоксары, 2005); Международном молодежном медицинском конгрессе "Санкт-Петербургские научные чтения" (Санкт-Петербург, 2005); научной конференции молодых ученых Ростовского государственного медицинского университета (Ростов-на-Дону, 2006); 63 ежегодном международном конгрессе американского общества по репродуктивной медицине (Вашингтон, 2007); научно-практическом симпозиуме с международным участием «Свободнорадикальная медицина и антиоксидантная терапия» (Волгоград, 2008); IV съезде Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Новосибирск, 2008).

Публикации: По теме диссертации опубликовано 20 печатных работ, в том числе 3 статьи и 3 тезиса в журналах, рекомендованных ВАК для публикации материалов кандидатских диссертационных работ.

Структура и объем диссертации: Диссертация изложена на 127 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы», главы «Результаты и их обсуждение», заключения, выводов, списка литературы, включающего 40 отечественных и 186 иностранных источников. Работа иллюстрирована 10 рисунками и 10 таблицами.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для биохимического анализа использовалась сперма 176 мужчин в возрасте 22-48 лет (средний возраст 32,5±2,5 года), которые проходили предварительное обследование в Центре репродуктивной медицины г. Красноярска по причине подозрения на бесплодие. У пациентов получено информированное согласие на проведение исследований. В зависимости от показателей спермограммы были выделены 4 группы пациентов: 1 – с нормозооспермией (n=95), 2 – с астенозооспермией (n=40), 3 – с тератозооспермией (n=19), 4 – с тератоастенозооспермией (n=22). Первая группа мужчин являлась контрольной (эякулят соответствовал нормативным показателями и обладал высокой оплодотворяющей способностью). Астенозооспермия – форма нарушения нормального сперматогенеза, когда подвижность ниже нормативных значений, тератозооспермия – когда морфология ниже нормативных значений, соответственно тератоастенозооспермия сочетанная патология. Нормативные значения эякулята (по руководству ВОЗ, 1992): объем 2,0 мл и более, рН 7,2 и более, концентрация 20 миллионов в 1 миллилитре, общая концентрация 40 миллионов, подвижность 50% и более подвижных, морфология менее 40% аномальных спермиев. Для сдачи спермы мужчины использовали метод мастурбации. Получению спермы предшествовало воздержание в течение 2-7 дней.


Pages:   || 2 | 3 | 4 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.