WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

Биоморфологическая характеристика некоторых лекарственных растений нгеан провинции вьетнама и оценка их эффективности на биологических моделях маркерной диагностики

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

НГУЕН АНЬ ЗУНГ

БИОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НЕКОТОРЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ НГЕАН ПРОВИНЦИИ ВЬЕТНАМА И ОЦЕНКА ИХ ЭФФЕКТИВНОСТИ НА БИОЛОГИЧЕСКИХ МОДЕЛЯХ МАРКЕРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

Специальность 03.02.01 Ботаника

03.03.04 Клеточная биология,

цитология, гистология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Астрахань 2010

Работа выполнена в Астраханском государственном университете

Научные руководители: доктор биологических наук, профессор Пилипенко Владимир Николаевич доктор медицинских наук, профессор Епинетов Михаил Александрович
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор, член - корр. РАМН Шимановский Николай Львович
доктор биологических наук Курочкина Татьяна Федоровна
Ведущая организация: Калмыцкий государственный университет

Защита состоится «04» июня 2010 г. в 1500 часов на заседании диссертационного совета Д 212.009.10 при Астраханском государственном университете по адресу: 414000, г. Астрахань, пл.Шаумяна 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Естественного института Астраханского государственного университета по адресу: 414000, г. Астрахань, пл.Шаумяна 1. http://aspu.ru

Автореферат разослан « » _____________________ 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор биологических наук, доцент А.В. Федотова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования.

В современной мировой науке и промышленности все большее значение приобретают исследования и технологии, направленные на сохранение и восстановление здоровья населения (Health Protections), в частности, поиск лекарственных растений с цитопротективным и противоопухолевым механизмом действия. Одним из наиболее перспективных направлений в этой области, по данным WHO, является поиск новых растительных источников в субтропической и тропической зонах.

Вьетнам - тропическая страна с различными климатическими и географическими особенностями в ее различных регионах. Она имеет изобилие разнообразных природных ресурсов. Жители Вьетнама не имея доступ к современным лекарствам приобрели огромный многовековой опыт использования лекарственных растений (Yagama Reddy Y.. A Glimpse of Vietnam’s Forest Wealth and Medicinal Plants-Based Traditional Medicine. J. Hum. Ecol.- 2005.-17(4): 293-299).

Нгеан - самая большая по площади провинция Вьетнама, которая расположена на северной части Центрального побережья. Около 83% площади Нгеана покрывается холмами, горами и лесами. В Нгеан произростает более 600 ценных диких лекарственных растений, многие из которых пока еще не изученных, хотя их целебные свойства давно используются в традиционной медицине Вьетнама (Зунг Н.А. Исследование разнообразия высших растений в деревне Мон-шон - буферная зона национального парка Пу-мат. Магистерская диссертация. Вьетнам, 2002; Зунг Н.А. Современное состояние использования лекарственных растений в коммуне Маудык, Конкуонг район, провинция Нгеан. Изд-во науки и техники, Ханой, Вьетнам- 2006. С.61-65).

Аналогичных работ по комплексной оценки эффективности лекарственных растений на биологических моделях маркерной диагностики не проводилось. Выбор места произрастания изучаемых лекарственных растений основан на эндемичной специфичности и высокой биологической активности сырья, связанной с особыми климатическими условиями Нгеан провинции Вьетнама.

Тема исследования поддержана Российским фондом фундаментальных исследований (РФФИ) и Вьетнамской академией наук и технологий (ВАНТ) в рамках Международного проекта Вьетнам-Россия № 09-03-90302.

Целю работы является изучение биоморфологии лекарственных растений Homalonema occulta (Lour.) Schott., Nelumbo nucifera Gaertn., Scoparia dulcis L., Stemona tuberosa Lour., Syzygium jambolana DC., Psychotria montana Blume, Ehretia asperula Zoll. & Moritzi, Erythropalum scandens Blume, Hedyotis diffusa Willd., Symplocos glomerata King ex C.B. Clarke, Sargentodoxa cuneata (Oliv.) Rehder et Wils., Symplocos cochinchinensis (Lour.) S. Moore, Pseuderanthemum palatiferum (Nees) Radlk собранных в Нгеан провинции Вьетнама и оценки их эффективности на биологических моделях маркерной диагностики.

Для достижения были поставлены задачи:

1. Экспедиция в заповедники Нгеан провинции Вьетнама для сбора и сушки листьев, корней и плодов лекарственных растений H. occulta, N. nucifera, S. dulcis, S. tuberosa, S. jambolana, P. montana, E. asperula, E. scandens, H. diffusa, S. glomerata, S. cuneata, S. сochinchinensis, P. palatiferum.



2. Дать биоморфологическую характеристику собранных лекарственных растений в Нгеан провинции Вьетнама.

3. Дать оценку эффективности экстрактов изучаемых растений на биологической модели клеточной маркерной диагностики пролиферации культур нормальных фибробластов, клеток рака молочной железы человека MCF-7 и рака шейки матки Hela.

4. Провести оценку эффективности экстрактов растений на биологической модели маркерной диагностики методом иммуногистохимического окрашивания экспрессии онкобелка Bcl-2.

5. Оценить эффективность экстрактов растений по способности конкурировать с меченными лигандами гормональных рецепторов за связывание со специфическими участками тканей-мишеней.

6. Определить антиоксидантную активность экстрактов методами хемилюминесценции, определения ТБК - активных продуктов по реакции взаимодействия с тиобарбитуровой кислотой (ТБК), определения содержания восстановленного глутатиона.

Научная новизна.

1. Впервые на биологических моделях маркерной диагностики изучено влияние экстрактов лекарственных растений собранных в Нгеан провинции Вьетнама на пролиферацию клеток HeLa (рак шейки матки человека) и МCF-(рак молочной железы), экспрессию онкобелка Bcl-2.

2. Впервые на клеточных линиях рака шейки матки (HeLa) и рака молочной железы человека (MCF-7) показана цитотоксическая активность густых экстрактов растений Erythropalum scandens, Pseuderanthemum palatiferum, Hedyotis diffusa.

3. Впервые в условиях экспериментальной гипоксии, вызванной субтоксическими дозами NaCN и ДНФ, установлено что, изучаемые экстракты растений Erythropalum scandens, Pseuderanthemum palatiferum и Hedyotis diffusa снижали уровень ТБК-активных продуктов в клетках, нормализовали протекающие с участием свободных радикалов окислительные процессы.

Научно-практическая значимость исследования состоит в том, что материалы диссертации могут быть использованы для последующих этапов разработки лекарственных препаратов, обладающих противоопухолевым, антиоксидантным, гормоноподобным действием.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Анализ биоморфологических признаков лекарственных растений H. occulta, N. nucifera, S. dulcis, S. tuberosa, S. jambolana, P. montana, E. asperula, E. scandens, H. diffusa, S. glomerata, S. cuneata, S. сochinchinensis, P. palatiferum собранных в экспедиции в Нгеан провинции Вьетнама.

2. Оценка эффективности экстрактов лекарственных растений собранных в Нгеан провинции Вьетнама на биологической модели клеточной маркерной диагностики пролиферации культур нормальных фибробластов, клеток рака молочной железы человека MCF-7 и рака шейки матки Hela.

4. Маркерная диагностика эффективности изучаемых экстрактов лекарственных растений на биологической модели методом иммуногистохимического окрашивания экспрессии онкобелка Bcl-2.

5. Оценка эффективности изучаемых экстрактов лекарственных растений на биологической модели маркерной диагностики по способности конкурировать с меченными лигандами гормональных рецепторов за связывание со специфическими участками тканей-мишеней.

6. Определение антиоксидантной активности изучаемых экстрактов лекарственных растений методами хемилюминесценции, определения ТБК - активных продуктов по реакции взаимодействия с тиобарбитуровой кислотой (ТБК), содержания восстановленного глутатиона.

Апробация работы. Диссертация обсуждена на заседании кафедры биологии и экологии растении биологического факультета и кафедры фармакологии химического факультета Астраханского государственного университета (г.Астрахань, 2008 г., 2010 г.).

Основные положения работы были изложены на II Всероссийской конференции-школы «Высокореакционные интермедиаты химических реакций» (г.Астрахань, 2007 г.), III Всероссийской конференции-школе с международным участием «Высокореакционные интермедиаты химических реакций» (г.Астрахань, 2008 г.), Международной конференции «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря и водоемов внутреннего стока Евразии» (г.Астрахань, 2008 г.), Международной конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы получения новых материалов» (г.Астрахань, 2009 г.), Международной научно-практической конференции «Экология биосистем: проблемы изучения, индикации и прогнозирования» (г.Астрахань, 2009 г.), 7-й Международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2010).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 19 работ, включая 5 статьи в научных журналах, рекомендуемых ВАК.

Объём и структура диссертации. Работа изложена на 131 страницах компьютерного текста, содержит 38 рисунков, 10 таблиц. Диссертация состоит из введения, 4 глав, выводов, библиографического списка, приложения.

ХАРАКТЕРИСТИКА НГЕАН ПРОВИНЦИИ ВЬЕТНАМА

Вьетнам обладает богатейшей флорой на Земле, насчитывающей свыше 12.000 видов растений. Сегодня, по оценкам, 75% процентов вьетнамцев используют традиционную медицину в качестве основного источника для лечения общих проблем здоровья (Зунг Т.Н., Ван Н.Д.Н., 2005).





По данным Министерства здравоохранения Вьетнама в настоящее время собраны более 40 тысяч рецептов при участии более 12 тысяч народных лекарей. Около 400 научных медицинских трудов древности дошли до наших времен и используются современными врачами. Например, современной традиционной медицине Вьетнама известны рукописи народного лекаря Туе Тинь, жившего в XIV н.э. Его труды содержат подробные описания, свойства и применение 499 лекарственных растений для лечения 184 видов заболеваний. Народный вьетнамский лекарь Ле Хыу Чак (XVIII в.) составил 66 книг объемом 5,5 тысяч страниц, в которых подробно описывает более 800 лекарственных растений. Примерно 1500 видов традиционных лекарственных средств в настоящее время имеют лицензию, выданная министерством здравоохранения будет продаваться на рынках Вьетнама (Анон., 2003a; Чань Ван Лау, 2003).

Академическими школами Винь университета были проведены различные ботанические исследования, в т.ч. исследования лекарственных растений Нгеана (Nha N.T, 1995,2001, 2006; Hanh N.Т.,1995, 1999, 2001; Osborn T. и др.,2000; Thin N.N.,2001, 2004; Chau D.Q.,2003; Dung N.A.,2002, 2006). Особенно, в 2001 году, по статистическим результатам Thin N.N., Hanh N.T., Nha N.T. в горном районе Нгеана растет 600 растений, обладающих лекарственными свойствами (Thin N.N. и др., 2001). Авторы также собирали ценные лечебные препараты на основе растительного лекарства, которые давно используются местными лекарями. Некоторые из этих рецептов подвергались проверкой на биологическую активность и формацевтические свойства. Проверка дала положительный результат. Например, препарат для лечения: гастрита, дерматита, воспаления почек (Hanh N.T., 1999, 2001, Thin N.N., Nha N.T., 2001).

В 2002 - 2006 г. проведены исследования, оценка разнообразности растительности в горном районе провинции Нгеана и определено более 600 лекарственных растений, найдено большое количество ценных лечебных лекарственных препаратов, принимаемых народом (Lam D.N. и др., 1987; Зунг Н.А., 2002, 2006). В том числе много ценных диких лекарственных растений до сих пор еще не применяются, хотя их целебные ценности известны.

Природные условия провинции Нгеан, Вьетнам

Провинция Нгеан принадлежит центральной области Вьетнама, с географическими координатами с 18033'10" к 19024'43" северной широты и с 103052'53" на 105045’50" восточной долготы. Общая площадь суши составляет 1.648.729 га, из которых 207.100 га для сельского хозяйства, 1.195.477га для лесоводства (в т.ч. 745.557 га с лесом, 490.165 га без леса).

В северо-восточной части Нгеана находятся цепи гор Чыонгшона со сложными, разнообразными топографическими характеристиками. Местность изрезана горами и реками, проходящими по направлению с Северо-запада к Юго-востоку. Место с наибольшей высотой является пик Пулайленг в горном районе Кушон, низменность располагается в восточных районах Куиньлыу, Зиентьяу, Иентхань. Бывает место (например, село Куиньтхань района Куиньлыу) находящееся выше морской поверхности только 0,2м. Горы и холмы занимает 83% общей площади провинции.

Нгеан расположен в тропической муссонной зоне. Климат формируется под непосредственным воздействием летнего (южного и юго-западного) и зимнего (северо-восточного) муссонов. По данным 2008 года: средняя температура 24,2 выше температуры предыдущих годов 0,2оС; годовой осадок - 1610,9мм; количество дождевых дней-157; средняя влажность года-84; количество солнечных часов года - 1460.

Проведен анализ литературных данных о лекарственных растениях, применяемых в традиционной народной медицине в Нгеане провинции. Выявили более 600 растений, которые используются народной медициной для лечения различных видов заболеваний (Nha N.T, 1995, 2001, 2006; Hanh N.Т., 1995, 1999, 2001; Thin N.N., 2001, 2004; Chau D.Q., 2003; Dung N.A., 2002, 2006). При анализе популярного уровня лекарственных растений во всех средств, определили 82 вида растений наиболее часто используемых для получения препаратов. Нами был проведен сбор 13 видов для изучения биоморфологии: H. occulta, N. nucifera, S. dulcis, S. tuberosa, S. jambolana, P. montana, E. asperula, E. scandens, H. diffusa, S. glomerata, S. cuneata, S. сochinchinensis, P. palatiferum.

ЭКСПЕДИЦИЯ В НГЕАН ПРОВИНЦИЮ ВЬЕТНАМА

Изучаемые лекарственные растения были собраны в горах Нгеан провинции в период с июля до октября 2008 г. После сбора растений, было проведено определение их научного названия, предварительной обработки, очистки, сушки на кафедре ботаники Винь университета Вьетнама в соответствии с документом «Research Methods in Plant Science» R.M.Klein, D.T.Klein (1979). Для классификации растений пользовались определительными ключами Ho P.H. (1999), и ботаническими описаниями в трудах «Flora of Vietnam», «Vietnam forest tree» (Forest inventory and planning Institute, Vietnam, 1996).

Для проведения микроскопического анализа сбора часть аналитической пробы помещали на чистую гладкую поверхность и выделяли вручную лопаточкой или препаровальной иглой составные компоненты сбора. При разборе руководствовались внешним видом сырья, рассматривая его невооруженным глазом или с помощью лупы (10х). Для каждого компонента сбора отбирали по 25-30 однородных по внешнему виду частиц и из них готовили микропрепараты. Микроскопическое исследование отдельных компонентов сбора проводили в соответствии с ГФ ХI изд. вып. «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного сырья» (Государственная фармакопея СССР, 1989).



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.