WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 |

Морфофункциональные особенности пульпы и дентиногенеза в условиях травматического периодонтита

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

БЕЗНОСИК ВАЛЕНТИНА НИКОЛАЕВНА

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ПУЛЬПЫ

И ДЕНТИНОГЕНЕЗА В УСЛОВИЯХ ТРАВМАТИЧЕСКОГО

ПЕРИОДОНТИТА

03.03.04 Клеточная биология, цитология, гистология

14.01.14 Стоматология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Оренбург 2010

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научные руководители:

Заслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессор

Стадников Александр Абрамович

Заслуженный врач РФ, доктор медицинских наук, профессор

Матчин Александр Артемьевич

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор

Брюхин Геннадий Васильевич

Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор

Соловьев Михаил Михайлович

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита состоится « __ » марта 2010 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 208.066.04 при ГОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 460000, Россия, Оренбург, ул. Советская, д. 6, зал заседаний диссертационного совета.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «ОрГМА Росздрава»

Автореферат разослан « __ » февраля 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор биологических наук, профессор Н.Н. Шевлюк

ВВЕДЕНИЕ

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

Актуальность данной темы обусловлена ростом стоматологической заболеваемости населения России, особенно в условиях, когда происходят изменения экологической среды, возрастание антропогенной нагрузки, особенности питания, водоснабжения, профессиональных факторов, образа жизни человека (Леонтьев В.К. с соавт., 2006; Киселёва E.A. с соавт., 2009).

В терапевтической стоматологии проблема успешного лечения пульпита и периодонтита все еще остается важной и до конца нерешенной. Статистические анализы и отчеты показывают, что посещаемость пациентов по поводу пульпита и периодонтита составляла 35% от всех посещений. (Боровский Е.В., 1998; Максимовский Ю.М., 2001). По данным ВОЗ периодонтит является самой частой причиной потери зубов. Результаты исследований в странах СНГ (Россия, Украина, Белоруссия, Казахстан) показали, что болезни периодонта охватывают 99,8— 100% взрослого населения и имеют устойчивую тенденцию возрастного увеличения.

Значительная распространенность периодонтита, большой процент неудач и осложнений при его лечении, сложность и трудоемкость врачебных манипуляций, а также частое отсутствие стабильности результатов, полученных при использовании традиционных методов лечения, объясняет несомненную актуальность проблемы лечения данного заболевания и постоянного поиска новых медикаментозных средств и методов лечения. Следует отметить, что зубы с признаками поражения пульпы зуба и периодонта очень часто являются причиной одонтогенных воспалительных процессов (Шаргородский А.Г., 1990; Пак А.Н., 1991; Боровский Е.В. с соавт., 1998; Гречишников В.В., 2000; Соловьева А.М.,2000; Максимовский Ю.М., 2001; Артюшкевич А.С. с соавт., 2006; Ашмарин А.Н, 2007).

На современном этапе предложено большое количество вариантов консервативной терапии, в том числе и при повторном лечении хронических форм периодонтита (Шухорова Ю.А., 2008), однако высокий процент рецидивов и осложнений требует дальнейшего изучения, разработки и совершенствования методов лечения этой патологии (Иорданишвили А.К., 2008; Kvist T., 2004). Остается открытым вопрос о применении антибактериальных препаратов различных групп для лечения периодонтита. Эмпирическое и безосновательное назначение антибиотиков больным нередко бывает не эффективно и способствует развитию резистентности к ним микроорганизмов. (Барер Г.М. с соавт., 1996; Купреева И.В., 1993; Dorfer C.E. et al.,2001). Возможность сохранения зуба (корня зуба) и, естественно, функционального единства всего зубного ряда является одной из важных проблем стоматологии.

В связи с этим вызывает интерес работы по применению гипоталамического нонапептида (окситоцина) для оптимизации репаративных гистогенезов различных тканей. К настоящему времени достаточно аргументированно сформулирована концепция о существенной роли гипоталамических нонапептидов в регуляции процессов пролиферации, роста, дифференцировки и функциональной специализации тканей различного генеза (Поленов А.Л., 1994; Курлаев П.П., 1985; Стадников А.А., 1999, 2001, 2005; Курлаев П.П. с соавт., 2000; Барков В.Н., 2004; Стадников Б.А., 1999, 2005; Stadnikov А. et al, 1997).

Вместе с тем влияние окситоцина на репаративные процессы мягких и твердых тканей зуба и окружающих его тканей с параллельной оценкой морфофункционального состояния нонапептидэргической нейросекреторной системы гипоталамуса практически не исследованы.



Все вышеизложенное определило цель и задачи настоящего исследования.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель работы – установить морфофункциональные особенности пульпы и дентиногенеза в условиях травматического периодонтита и экспериментально - гистологически обосновать целесообразность применения окситоцина в лечении периодонтита.

Для достижения поставленной цели решены следующие задачи:

1. Выявить морфофункциональные изменения в тканях пульпы зубов, а также состояние периодонта и гипоталамо-гипофизарной нейросекреторной системы (ГГНС) при заживлении раневого дефекта в условиях экспериментальной модели травматического периодонтита без инфицирования и при дополнительном инфицировании S. аureus.

2. Экспериментально — гистологически оценить влияние окситоцина на процессы регенерации тканей периодонта и пульпы зубов в эксперименте.

3. В сравнительном аспекте проанализировать влияние антибиотика (линкомицина), а также данного антибиотика в сочетании с окситоцином на воспалительный процесс в периодонте в условиях экспериментального травматического периодонтита, в том числе и при дополнительном инфицировании S. аureus.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ

1. Впервые с использованием методов световой и электронной микроскопии, гистохимии и морфометрии с последующим статистическим анализом количественных данных выявлены морфофункциональные особенности пульпы, дентиногенеза и периодонта в условиях травматического периодонтита.

2. Получены новые факты, свидетельствующие о том, что разбалансировка секреторного процесса нонапептидергических нейросекреторных центров гипоталамуса существенно лимитирует репаративный гистогенез пульпы, дентина и тканей периодонта.

3. Экспериментально -гистологически доказана адаптогенная и оптимизирующая роль окситоцина в реализации структурами периодонта, пульпы и дентина своих репаративных возможностей.

4. Экспериментально подтверждено, что окситоцин обладает антибиотическим действием и способностью оказывать выраженное синергидное действие на антибиотики (в частности линкомицин), проявляющие свое негативное воздействие на S.аureus, а также активизирующее влияние на фагоцитарную активность макрофагов.

ВНЕДРЕНИЕ

Результаты диссертационной работы внедрены в учебный процесс на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии; стоматологии и челюстно — лицевой хирургии Оренбургской государственной медицинской академии, а также используются в НИР ПНИЛ «Нейросекреторная регуляция взаимодействия про- и эукариот» Оренбургского филиала ЮУНЦ РАМН.

НАУЧНО ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Экспериментально - гистологически обоснована целесообразность использования окситоцина, в том числе в сочетании с антибиотиком для лечения пульпита, периодонтита и их гнойных осложнений. Окситоцин коррегирует и оптимизирует репаративные процессы в твердых и мягких тканях зуба, что открывает новые перспективы в изучении роли нейроэндокринной регуляции взаимодействий про- и эукариот в условиях инфицирования тканей челюстно-лицевой области.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Усугубляющими факторами в развитии посттравматического пульпита и периодонтита (по критериям светооптического и ультраструктурного анализа пульпы, дентина, тканей периодонта) являются: разбалансировка секреторного процесса крупноклеточных ядер гипоталамуса, блокировка высвобождения нейросекрета, высокий персистентный потенциал бактериальных патогенов.

2. Применение окситоцина включает механизм эффективного антибактериального воздействия антибиотика.

3. Местное введение окситоцина, в том числе и в сочетании с антибиотиком, коррегирует нарушенный клеточный гомеостаз в очагах периодонтита, стимулирует остео- и дентиногенез, что создает условия для отграничения некротических структур в инфицированных условиях.

АПРОБАЦИЯ ДИССЕРТАЦИОННОГО МАТЕРИАЛА

Результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на: Научной конференции, посвященной 75 – летию со дня основания кафедры стоматологии Ленинградского института усовершенствования врачей (Санкт-Петербург, 2004); 7–й Всероссийской научной конференции «Нейроэндокринологии – 2005» (Санкт-Петербург, 2005); Научно – практической конференции хирургов, посвященной 100-летию со дня рождения профессора С.П. Вилесова (Оренбург, 2005); Научно – практической конференции врачей Приволжско-Уральского военного округа (Оренбург, 2006, 2007); Научном совещании ВМА «Актуальные проблемы учения о тканях» (Санкт-Петербург, 2006); 8-м Конгресе Международной ассоциации морфологов (Орел, 2006); Научной конференции, посвященной 70-летию Тверской государственной медицинской академии (Тверь, 2006); 12-й и 13-й Международной конференции челюстно-лицевых хирургов (Санкт-Петербург, 2007, 2008); Всероссийской научной конференции, посвященной памяти члена-корреспондента АМН СССР, профессора Ф.М. Лазаренко (Оренбург, 2008); X Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы военной и практической медицины» (Оренбург, 2009).

По теме диссертации опубликовано 15 научных работ, из которых четыре в изданиях рекомендованных ВАК РФ.





СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация изложена на 147 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, главы результатов собственных исследований, их обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа содержит 6 таблиц и 33 рисунка. Список литературы содержит 309 источников, включающего 219 отечественных и 90 иностранных работ.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальные исследования проведены на 96 половозрелых белых беспородных крысах - самцах массой 220-250 г.

Все животные содержались в стандартных условиях вивария на полноценной диете и были одного возраста.

Под эфирным рауш-наркозом с соблюдением правил асептики и антисептики всем животным создавали модель травматического периодонтита моляров нижней челюсти. Для этого с помощью бормашины шаровидным бором диаметром 2 мм в альвеолярном отростке нижней челюсти в проекции верхушек корней зубов высверливали отверстия с повреждением периодонта и цемента зубов.

Было проведено восемь серий опытов (каждая по 12 животных).

В первой серии (контрольная) проводилось наблюдение животных с экспериментальной моделью травматического периодонтита без дополнительного инфицирования и введения в область травмы антибиотика и окситоцина.

Во второй серии опытов при создании модели травматического периодонтита в область раны вводился антибиотик линкомицин (ОАО «Дальхимфарм») 30% по 0,2 мл, а также в той же дозе через 1,3,5 и 7 суток после операции.

В третьей серии опытов в область раны вводили окситоцин (Гедеон Рихтер А.О., Венгрия) тонкой иглой с помощью инъекционного шприца в разовой дозе

1 МЕ во время операции и через 1, 3, 5, 7 суток после операции.

В четвертой серии опытов при создании модели травматического периодонтита в область раны вводили окситоцин в разовой дозе 1 МЕ и линкомицин 30% по 0,2 мл во время операции и в 1, 3, 5, 7 сутки после операции в вышеуказанных дозах.

В пятой серии опытов в область раны капельно вводили взвесь S.aureus (штамм 209Р) в дозе 3109 микробных тел в 1 мл изотонического раствора хлорида натрия с помощью шприца с тупой иглой (Левенец А.А., Шувалов С.М., Поляков А.В., 1989).

В шестой серии опытов в дополнительно инфицированную стафилококком S.aureus область модели травматического периодонтита вводили линкомицин 30% по 0,2 мл и в той же дозе на 1,3,5 и 7 сутки после операции.

В седьмой серии опытов в область создаваемого дефекта, дополнительно инфицированного золотистым стафилококком в вышеуказанной дозе, инъекционно вводили окситоцин в дозе 1 МЕ во время операции и через 1, 3, 5, 7 суток после неё.

В восьмой серии опытов при создании модели травматического периодонтита область раны дополнительно инфицировали стафилококком S.аureus и вводили окситоцин в дозе 1 МЕ и линкомицин (30% по 0,2мл). В дальнейшем подводился окситоцин в сочетании с антибиотиком в вышеуказанных дозах на 1,3,5 и 7 сутки после операции.

Животные выводились из опыта путем ингаляции летальной дозы эфира на 3, 5, 10, 30 сутки (по 3 особи в каждой серии).

При проведении экспериментов соблюдался Федеральный закон принятый Государственной Думой 1 декабря 1999 г. «О защите животных от жестокого обращения», а также «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных» согласно приказу МЗ СССР №755 от 12.08.1987г.

С использованием методов световой и электронной микроскопии, иммуноцитохимии и морфометрии исследовали ткани зуба, прилежащую область периодонта, паравентрикулярные и супраоптические ядра гипоталамуса, нейрогипофиз.

Для светооптических исследований материал фиксировали в 10% водном растворе нейтрального формалина, спирт-формоле, жидкости Буэна, обезвоживали в спиртах возрастающей концентрации и заливали целлоидин-парафином. Приготовление серийных срезов толщиной 5-6 мкм осуществляли на ротационном микротоме МПС-2. Депарафинированные срезы окрашивали гематоксилином Майера и эозином. Идентифицировали гликозаминогликаны – толуидиновым синим при значении рН 2,7-3,0, рибонуклеопротеиды – метиленовым зеленым и пиронином «G» по Браше. Гликоген и нейтральные мукополисахариды (гликопротеиды) определяли с помощью перйодат-Шифф реакции по Мак-Манусу. Гистохимические реакции сопровождались соответствующими ферментативными контролями (Э. Пирс, 1962).

Для электронномикроскопических исследований материал фиксировали при +4С в 2,5%-м растворе глютарового альдегида на S-коллединовом буфере (рН 7,2-7,4). Постфиксацию проводили в четырехокиси осмия по прописи G. Millonig (1961). Материал обезвоживали при комнатной температуре в ацетоне возрастающей концентрации и помещали в смолу ЭПОН-812. Полимеризацию объектов проводили при +60 С в течение 2 суток. С каждого блока на ультратоме LKB-5 (Sweden-Bromma) получали полутонкие (1мкм) и ультратонкие (40-60 нм) срезы. Полутонкие срезы окрашивали метиленовым синим и основным фуксином по прописи Sato М. et Shamoto Е. (1973). Полутонкие срезы использовали при подготовке блоков к заточке перед изготовлением ультратонких срезов, а также для анализа тканей и клеточной организации на световом уровне.

Ультратонкие срезы подвергали двойному контрастированию насыщенным спиртовым раствором уранилацетата при температуре +37С в течение 20 минут и цитрате свинца по Reynolds (1963). Срезы изучали на электронном микроскопе ЭМВ 100АК, фотографирование структур проводили при увеличении от 5400 до 40000.

Морфометрическое исследование выполняли на препаратах с использованием стандартной окулярной сетки Автандилова Г.Г. (1990), а также винтового окуляр-микрометра МОВ-1-15xУ4,2.



Pages:   || 2 | 3 | 4 |
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.